Dissertação

Perfil de express?o dos microRNAs 15 e 16 em c?lulas humanas durante infec??o experimental pelo v?rus Dengue

A dengue ? uma doen?a febril aguda causada por um v?rus do g?nero Flavivirus, fam?lia Flaviviridae, end?mica nas regi?es tropicais e subtropicais do planeta. O agente ? um v?rus com RNA de fita simples, classificado em quatro sorotipos distintos V?rus Dengue (VDEN) 1, 2, 3 e 4. As respostas imunol?g...

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Autor principal: Melo, Karla Fabiane Lopes de
Grau: Dissertação
Idioma: por
Publicado em: MS/SVS/Instituto Evandro Chagas 2018
Assuntos:
Acesso em linha: http://patua.iec.gov.br//handle/iec/3537
Resumo:
A dengue ? uma doen?a febril aguda causada por um v?rus do g?nero Flavivirus, fam?lia Flaviviridae, end?mica nas regi?es tropicais e subtropicais do planeta. O agente ? um v?rus com RNA de fita simples, classificado em quatro sorotipos distintos V?rus Dengue (VDEN) 1, 2, 3 e 4. As respostas imunol?gicas inatas e adaptativas do hospedeiro exercem importante fun??o na determina??o da hist?ria natural das infec??es virais, especialmente na dengue. Neste contexto vem sendo observado nos ?ltimos anos que ? cada vez maior a presen?a de pequenos RNAs nos processos de infec??o viral, assim como de defesa imunol?gica. Tornando cada vez mais necess?rio o melhor entendimento do papel destes pequenos RNAs durante o da infec??o viral por VDEN. Sendo assim, avaliamos a express?o dos miRNA-15, miRNA16 e das vias de caspase 3 e 7 em linhagens cont?nuas/ humanas durante a infec??o pelos v?rus DEN-1, DEN-2, DEN-3 e DEN-4. As c?lulas foram extra?das utilizando beads magn?ticas e guardadas a -70oC at? o momento de uso, para a quantifica??o da carga viral foi utilizado o m?todo TaqMan com sondas marcadas em conjunto com o m?todo de quantifica??o por curva absoluta atrav?s de um plasm?deo clonado em vetor do genoma dos quatro sorotipos, al?m de sondas marcadas para os miRNA usados no estudo. A quantifica??o da via de caspase 3 e 7 foi realizado com o uso de marcadores utilizando luciferina. Foi poss?vel observar uma rela??o entre as vias de apoptose e os miRNAs-15 e 16, al?m dos mesmos demonstrarem que c?lulas hep?ticas de origem humana sofrem mais intenso processo de apoptose durante infec??o por VDEN. Esses achados refor?am a hip?tese que estes miRNAs est?o envolvidos com o processo de apoptose durante a infec??o por VDEN e que isto acaba por agravar a infec??o principalmente nos hepat?citos.