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Dissertação
Investiga??o de arbov?rus e v?rus espec?ficos de insetos a partir de d?pteros hemat?fagos coletados no sudeste do Par? (Marab?, Cana? dos Caraj?s e Curian?polis) no per?odo de 2014 a 2015
Os arbov?rus s?o v?rus transmitidos por artr?podes hemat?fagos e s?o mantidos na natureza sendo veiculados aos humanos e animais por meio da picada do artr?pode, bem como, pelas vias transovariana e ven?rea. Os v?rus espec?ficos de insetos (ISV), s?o v?rus que infectam naturalmente os artr?podes hem...
Autor principal: | Ribeiro, Ana Cl?udia da Silva |
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Grau: | Dissertação |
Idioma: | por |
Publicado em: |
MS/SVS/Instituto Evandro Chagas
2019
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Assuntos: | |
Acesso em linha: |
http://patua.iec.gov.br//handle/iec/3724 |
Resumo: |
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Os arbov?rus s?o v?rus transmitidos por artr?podes hemat?fagos e s?o mantidos na natureza sendo veiculados aos humanos e animais por meio da picada do artr?pode, bem como, pelas vias transovariana e ven?rea. Os v?rus espec?ficos de insetos (ISV), s?o v?rus que infectam naturalmente os artr?podes hemat?fagos. E, neste contexto, encontra-se a Amaz?nia Brasileira, que alberga v?rios projetos mineradores que interferem nos aspectos faun?sticos e flor?sticos dessas regi?es. Assim, o presente estudo visa investigar a circula??o de arbov?rus e ISV a partir de dipteros hemat?fagos coletados no Sudeste do Par? (Marab?, Cana? dos Caraj?s e Curion?polis) no per?odo de 2014 a 2015. Foram processadas 498 pools de artr?podes hemat?fagos, sendo que a maior parte das amostras foram coletadas nas ?reas de Cana? dos Caraj?s-PA, que correspondeu a cerca de 76,0% (379/498), seguida de Curion?polis-PA corresponderam a cerca de 12,6% (63/498) e Marab?-PA foi 11,4% (57/498). Os pools de insetos foram inoculados em culturas de c?lulas VERO e C6/36 e, posteriormente, foi realizada a imunofluresc?ncia indireta (IFI), a rea??o da transcriptase reversa seguida de rea??o em cadeia da polimerase (RT-PCR) e o sequenciamento nuclet?dico de alguns isolados virais. Dentre as 498 amostras de pools de artr?podes hemat?fagos inoculados nas linhagens C6/36 e VERO, 15,6% (77/498) destas apresentaram efeito citopatico (ECP) na c?lula C6/36, 0,6% (3/498) amostras apresentaram ECP na c?lula VERO; 83,8% (418/498) das amostras n?o apresentaram ECP em nenhuma das linhagens utilizadas. O ECP observado nas linhagens VERO e C6/36 infectadas foi do tipo l?tico, caracterizado pela presen?a de c?lulas mortas, bem como a refra??o refrig?ncia celular e a forma??o de sinc?cios at? a completa destrui??o da monocamada. Dentre as 80 amostras com ECP, as quais foram selecionadas de forma aleat?ria, uma amostragem de oito isolados foi selecionada para a realiza??o do sequenciamento nucleot?dico completo, e as demais amostras que apresentaram resultados de IFI e de RT-PCR negativos formaram um banco de amostras na soroteca da SAARB-IEC, visto que n?o foi possivel trabalhar com todas as amostras devido limita??o para a realiza??o de sequenciamento, t?cnica bastante cara. Atrav?s das an?lises filogen?ticas, identificou-se a ocorr?ncia de uma variedade de ISVs nas oito amostras sequenciadas, sendo a maioria delas pertencentes ao t?xon Negev?rus (v?rus Brejeira, Negev, Cordoba, Wallerfield e Feitosa) na ?rea de abrang?ncia do projeto S11D. Um ISV (v?rus Brejeira) tamb?m foi detectado na ?rea de abrang?ncia do projeto Serra Leste. Obteve-se tamb?m o isolamento de dois negev?rus pela primeira vez no Brasil, o v?rus Cordoba e o v?rus Negev. Em Cana? dos Caraj?s, foram detectados dois novos v?rus para a ci?ncia: o negev?rus Feitosa e um v?rus diferente relacionado ao v?rus Wenzhou picorna-like 46, nomeado, v?rus Cana?. N?o foram detectados arbov?rus pertencentes aos g?neros Flavivirus, Alphavirus, Orthobunyavirus e Phlebovirus nas 80 amostras inclu?dos na pesquisa. Assim, s?o muito relevantes os resultados deste trabalho, pois demonstram que a regi?o estudada apresenta uma grande diversidade de ISVs que precisam ser mais bem estudados, at? mesmo, no que diz respeito aos ISVs possivelmente em interferir na transmiss?o dos arbov?rus. |