Dissertação

Efeito da administração do G-CSF in vivo na cinética de mobilização das células tronco mesenquimais e hematopoéticas da medula óssea para o sangue periférico e produção de citocinas em cultura primária

As células-tronco mesenquimais (CTM) apresentam potencial regenerativo não somente pela sua plasticidade, mas também pela sua capacidade de modular a resposta imunológica com efeitos imunossupressores e secreção de um largo espectro citocinas. O G-CSF é um potente fator de crescimento celular e tem...

ver descrição completa

Autor principal: Garcia, Nadja Pinto
Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/9629731844222885
Grau: Dissertação
Idioma: por
Publicado em: Universidade Federal do Amazonas - Fundação de Hematologia e Hemoterapia do Amazonas 2015
Assuntos:
Acesso em linha: http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/4056
id oai:https:--tede.ufam.edu.br-handle-:tede-4056
recordtype dspace
spelling oai:https:--tede.ufam.edu.br-handle-:tede-40562016-05-05T17:46:37Z Efeito da administração do G-CSF in vivo na cinética de mobilização das células tronco mesenquimais e hematopoéticas da medula óssea para o sangue periférico e produção de citocinas em cultura primária Garcia, Nadja Pinto Malheiro, Adriana http://lattes.cnpq.br/9629731844222885 http://lattes.cnpq.br/2627415957053194 Célula tronco mesenquimal Célula tronco hematopoética G-CSF Mobilização Citocinas Mesenchymal stem cells Hematopoietic stem cells Cytokines CIÊNCIAS DA SAÚDE As células-tronco mesenquimais (CTM) apresentam potencial regenerativo não somente pela sua plasticidade, mas também pela sua capacidade de modular a resposta imunológica com efeitos imunossupressores e secreção de um largo espectro citocinas. O G-CSF é um potente fator de crescimento celular e tem a capacidade de mobilizar as CTs para o sangue periférico permitindo fácil obtenção destas células. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência de diferentes doses de G-CSF na cinética de mobilização das CTHs e CTMs para o sangue periférico e no perfil de citocinas produzidas in vitro por essas células. Foram utilizados 6 grupos com 12 camundongos fêmeas Swiss, grupo controle e 5 grupos de doses 1, 2, 3, 4 e 5 de G-CSF. As CTHs e CTMs mobilizadas foram identificadas por meio de marcadores celulares específicos por citometria de fluxo. As amostras de CTHs e CTMs, de sangue periférico (SP) e medula óssea (MO) foram cultivadas in vitro e as citocinas foram dosadas nos sobrenadantes destas culturas pela técnica de Cytometric Bead Array (CBA). O pico de CTMs mobilizadas ocorreu com 4 doses na MO e com 5 doses de G-CSF no SP. As CTHs atingiram o pico com 2 doses de G-CSF na MO e com 4 doses no SP. Houve uma maior mobilização de CTMs do que CTHs, porém essa razão CTM/CTH ainda foi maior na MO. As culturas de MO das doses 3, 4 e 5 de G-CSF apresentaram células aderentes fibroblastóides, enquanto que foram observadas nas culturas de sangue de 2 e 3 doses de G-CSF. Houve uma maior produção das citocinas IL-6, TNF-α na fase inicial do cultivo das CTs, tanto MO quanto SP. O IFN-γ apresentou-se elevado na fase inicial, porém atingiu um pico no final do cultivo. As citocinas IL-2, IL-4, IL-17A e IL-10 tiveram um comportamento semelhante atingindo pico de concentração na fase tardia do cultivo. Na análise da frequência de altos produtores de citocinas para cada dose administrada de G-CSF in vivo, observou-se um comportamento semellhante das citocinas das culturas de MO e SP. A maioria das citocinas produzidas nas culturas de 5 doses tanto de MO quanto de SP apresentaram diferença significativa com relação a doses inferiores de G-CSF. Esse estudo sugeriu uma possível influência do G-CSF não somente na mobilização, como já é conhecido, mas também na produção de várias citocinas inflamatórias e anti-inflamatótrias, podendo possivelmente atuar no estímulo da diferenciação e modulação das CTMs. The mesenchymal stem cells (MSCs) have regenerative potential by its plasticity and ability to modulate the immune response with immunossupressive effects and secretion of a broadspectrum cytokines. The G-CSF is a potent cell growth factor and has the ability to mobilize SCs into peripheral blood. The aim of this study was to evaluated the influence of different doses of G-CSF on the kinetics at HSC and MSCs mobilization into peripheral blood and the G-CSF effect on the cytokine profile produced by these cells in vitro. We used six groups of 12 female Swiss mice, control group and five doses groups 1, 2, 3, 4 and 5 of G-CSF. The HSCs and MSCs mobilized were identified using cell markers performed by flow cytometry. The peripheral blood (PB) and bone marrow (BM) samples were used of each group to obtain the HSCs and MSCs, which were cultivated in vitro. Cytokines were measured in supernatants of PB and BM cultures by Cytometric Bead Array (CBA). The MSCs mobilized peak occurred with 4 doses of G-CSF in BM and 5 doses in PB. The HSC peaked occurred with 2 doses of G-CSF in BM and 4 doses in PB. There was a greater mobilization of MSCs than HSC, but that reason MSC/HSC was even greater in BM. The BM Cultures doses 3, 4 and 5 of G-CSF showed fibroblastoid adherent cells while in the PB cultures it was in cultures doses 2 and 3 doses of G-CSF. There was an increased production of IL-6, TNF-α in early cultivation of the SCs both BM and PB. The IFN-γ was increased in the initial phase, but peaked at the end of cultivation. The IL-2, IL-4, IL-17A and IL-10 cytokines had similar behavior reaching peak concentration in the late stage of cultivation. In the analysis of high frequency of cytokine producers for each dose of G-CSF in vivo, we observed same behavior cytokine in BM and PB cultures. Most of the cytokines produced in both BM and PB cultures of five doses showed significant differences about lower doses of G-CSF. This study suggested a possible influence of G-CSF to mobilize cells, as is known, but also in the production of several inflammatory and anti-inflammatory cytokines and possibly stimulate and modulate the differentiation of MSCs. CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior 2015-06-11T19:20:53Z 2011-11-24 Dissertação GARCIA, Nadja Pinto. Efeito da administração do G-CSF in vivo na cinética de mobilização das células tronco mesenquimais e hematopoéticas da medula óssea para o sangue periférico e produção de citocinas em cultura primária. 2011. 106 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2011. http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/4056 por Acesso Aberto application/pdf Universidade Federal do Amazonas - Fundação de Hematologia e Hemoterapia do Amazonas Faculdade de Medicina Brasil UFAM - HEMOAM Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde
institution TEDE - Universidade Federal do Amazonas
collection TEDE-UFAM
language por
topic Célula tronco mesenquimal
Célula tronco hematopoética
G-CSF
Mobilização
Citocinas
Mesenchymal stem cells
Hematopoietic stem cells
Cytokines
CIÊNCIAS DA SAÚDE
spellingShingle Célula tronco mesenquimal
Célula tronco hematopoética
G-CSF
Mobilização
Citocinas
Mesenchymal stem cells
Hematopoietic stem cells
Cytokines
CIÊNCIAS DA SAÚDE
Garcia, Nadja Pinto
Efeito da administração do G-CSF in vivo na cinética de mobilização das células tronco mesenquimais e hematopoéticas da medula óssea para o sangue periférico e produção de citocinas em cultura primária
topic_facet Célula tronco mesenquimal
Célula tronco hematopoética
G-CSF
Mobilização
Citocinas
Mesenchymal stem cells
Hematopoietic stem cells
Cytokines
CIÊNCIAS DA SAÚDE
description As células-tronco mesenquimais (CTM) apresentam potencial regenerativo não somente pela sua plasticidade, mas também pela sua capacidade de modular a resposta imunológica com efeitos imunossupressores e secreção de um largo espectro citocinas. O G-CSF é um potente fator de crescimento celular e tem a capacidade de mobilizar as CTs para o sangue periférico permitindo fácil obtenção destas células. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência de diferentes doses de G-CSF na cinética de mobilização das CTHs e CTMs para o sangue periférico e no perfil de citocinas produzidas in vitro por essas células. Foram utilizados 6 grupos com 12 camundongos fêmeas Swiss, grupo controle e 5 grupos de doses 1, 2, 3, 4 e 5 de G-CSF. As CTHs e CTMs mobilizadas foram identificadas por meio de marcadores celulares específicos por citometria de fluxo. As amostras de CTHs e CTMs, de sangue periférico (SP) e medula óssea (MO) foram cultivadas in vitro e as citocinas foram dosadas nos sobrenadantes destas culturas pela técnica de Cytometric Bead Array (CBA). O pico de CTMs mobilizadas ocorreu com 4 doses na MO e com 5 doses de G-CSF no SP. As CTHs atingiram o pico com 2 doses de G-CSF na MO e com 4 doses no SP. Houve uma maior mobilização de CTMs do que CTHs, porém essa razão CTM/CTH ainda foi maior na MO. As culturas de MO das doses 3, 4 e 5 de G-CSF apresentaram células aderentes fibroblastóides, enquanto que foram observadas nas culturas de sangue de 2 e 3 doses de G-CSF. Houve uma maior produção das citocinas IL-6, TNF-α na fase inicial do cultivo das CTs, tanto MO quanto SP. O IFN-γ apresentou-se elevado na fase inicial, porém atingiu um pico no final do cultivo. As citocinas IL-2, IL-4, IL-17A e IL-10 tiveram um comportamento semelhante atingindo pico de concentração na fase tardia do cultivo. Na análise da frequência de altos produtores de citocinas para cada dose administrada de G-CSF in vivo, observou-se um comportamento semellhante das citocinas das culturas de MO e SP. A maioria das citocinas produzidas nas culturas de 5 doses tanto de MO quanto de SP apresentaram diferença significativa com relação a doses inferiores de G-CSF. Esse estudo sugeriu uma possível influência do G-CSF não somente na mobilização, como já é conhecido, mas também na produção de várias citocinas inflamatórias e anti-inflamatótrias, podendo possivelmente atuar no estímulo da diferenciação e modulação das CTMs.
author_additional Malheiro, Adriana
author_additionalStr Malheiro, Adriana
format Dissertação
author Garcia, Nadja Pinto
author2 http://lattes.cnpq.br/9629731844222885
author2Str http://lattes.cnpq.br/9629731844222885
title Efeito da administração do G-CSF in vivo na cinética de mobilização das células tronco mesenquimais e hematopoéticas da medula óssea para o sangue periférico e produção de citocinas em cultura primária
title_short Efeito da administração do G-CSF in vivo na cinética de mobilização das células tronco mesenquimais e hematopoéticas da medula óssea para o sangue periférico e produção de citocinas em cultura primária
title_full Efeito da administração do G-CSF in vivo na cinética de mobilização das células tronco mesenquimais e hematopoéticas da medula óssea para o sangue periférico e produção de citocinas em cultura primária
title_fullStr Efeito da administração do G-CSF in vivo na cinética de mobilização das células tronco mesenquimais e hematopoéticas da medula óssea para o sangue periférico e produção de citocinas em cultura primária
title_full_unstemmed Efeito da administração do G-CSF in vivo na cinética de mobilização das células tronco mesenquimais e hematopoéticas da medula óssea para o sangue periférico e produção de citocinas em cultura primária
title_sort efeito da administração do g-csf in vivo na cinética de mobilização das células tronco mesenquimais e hematopoéticas da medula óssea para o sangue periférico e produção de citocinas em cultura primária
publisher Universidade Federal do Amazonas - Fundação de Hematologia e Hemoterapia do Amazonas
publishDate 2015
url http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/4056
_version_ 1781301956406411264
score 11.653393