Os dermatófitos compreendem um grupo de fungos filamentosos de grande interesse na área
da saúde, devido à sua capacidade de parasitar os tecidos queratinizados, como a pele, pêlos e
unhas, e à sua ampla distribuição no mundo. Como conseqüência desse parasitismo instala-se
um processo infeccioso de dermatofitose, a partir do qual pode ocorrer uma diversidade de
manifestações clínicas, acometendo pessoas de ambos os gêneros e de todos os grupos etários.
Os métodos laboratoriais para o diagnóstico micológico nem sempre permitem uma clara
definição do agente em nível de espécie. No presente estudo foram analisadas diferentes
estratégias para a extração de DNA e para a identificação molecular por PCR-RFLP das
principais espécies de dermatófitos. Duas regiões alvo, a região ITS/DNAr e o gene da
topoisomerase II foram analisadas, testando-se três protocolos de PCR e três enzimas de
restrição (DdeI, HinfI, HaeIII). Na extração do DNA, o método de lise utilizando pérolas de
vidro e a separação do DNA com base no método de Gustincich (1991) demonstrou
importantes vantagens. Nossos resultados demonstraram que o gene da topoisomerase II é
uma região alvo adequada para identificação das sete principais espécies de fungos
dermatófitos patogênicos, reforçando estudos anteriores, e apontaram para um novo protocolo
de RFLP-PCR, que se baseia em uma PCR desse gene utilizando o primer dPsD2, seguido da
digestão dos produtos obtidos com a enzima de restrição HaeIII.
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