Leveduras associadas ao ninho das abelhas sem ferrão Melipona interrupta e Cephalotrigona femorata (Apidae: Meliponini): identificação e aspectos biotecnológicos
As abelhas nativas sem ferrão (Apidae: Meliponini) apresentam interações simbióticas com as leveduras, apontadas como as principais responsáveis pela fermentação do pólen, alimento preferido pelos meliponídeos, e pela fermentação de outros materiais de origem vegetal coletados pelas abelhas. Nest...
| Autor principal: | Meireles, Sabrina da Fonseca |
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| Outros Autores: | http://lattes.cnpq.br/2624085938167184 |
| Grau: | Dissertação |
| Idioma: | por |
| Publicado em: |
Universidade Federal do Amazonas
2018
|
| Assuntos: | |
| Acesso em linha: |
https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6771 |
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oai:https:--tede.ufam.edu.br-handle-:tede-67712018-11-22T05:03:27Z Leveduras associadas ao ninho das abelhas sem ferrão Melipona interrupta e Cephalotrigona femorata (Apidae: Meliponini): identificação e aspectos biotecnológicos Associated yeasts in stingless bee nests of melipona interrupta and cephalotrigona femorata (Apidae: meliponini): identification and biotechnological aspects Meireles, Sabrina da Fonseca Silva, Carlos Gustavo Nunes da http://lattes.cnpq.br/2624085938167184 http://lattes.cnpq.br/6225536299087624 Souza, João Vicente Braga de http://lattes.cnpq.br/7804981785557071 Carvalho, Elen Betheleen de Souza http://lattes.cnpq.br/1223389633924270 Leveduras Abelhas sem ferrão Perfil de restrição Simbiose Inseto Yeast Stingless bees Restriction profile Symbiosis CIÊNCIAS BIOLÓGICAS As abelhas nativas sem ferrão (Apidae: Meliponini) apresentam interações simbióticas com as leveduras, apontadas como as principais responsáveis pela fermentação do pólen, alimento preferido pelos meliponídeos, e pela fermentação de outros materiais de origem vegetal coletados pelas abelhas. Neste projeto, foi proposto identificar leveduras associadas ao ninho de duas abelhas nativas da Amazônia e estabelecer um banco de estirpes amazônicas de referência. Para isso, os substratos (pólen, mel, alimento larval e cera) foram coletados do ninho de Melipona interrupta e Cephalotrigona femorata em três meliponários, localizados em Iranduba, Parintins e Paraná de Parintins, (n=12 amostras). Os procedimentos metodológicos adotados neste trabalho seguem a seguinte ordem: (1) isolamento em YPD, (2) triagem em CHROMágar para separação dos isolados em grupos de cores, (3) extração de DNA, (4) triagem de padrões moleculares por PCR/RFLP baseado na amplificação das regiões 18S, ITS1-5,8S-ITS2 e D1/D2 do gene 26S rRNA e digestão do amplicon com a enzima Dde I (5) sequenciamento dos amplicons dos diferentes padrões obtidos na RFLP e a identificação mediante comparação das sequências obtidas contra os bancos de dados de sequências nucleotídicas do consórcio INSDC, com auxílio da ferramenta BLASTN. Foram isoladas 749 leveduras associadas ao ninho das abelhas Melipona interrupta e Cephalotrigona femorata, das quais, 15 linhagens foram identificas, a saber: SM01 Candida sp., SM02 Hyphopichia sp., SM03 Rhodotorula sp., SM04 Wickerhamiella versalitis, SM05 Debaryomyces sp., SM06 Candida orthopsilosis, SM07 Candida apícola, SM08 Metschnikowia sp., SM09 Zygosaccharomyces siamensis, SM10 Hanseniaspora opuntiae, SM11 Pichia sp., SM12 Pichia kluyveri, SM13 Trichosporon asahii, SM14 Kodamaea ohmeri e SM15 Aureobasidium sp. Este trabalho resultou em (1) dados inéditos a respeito das leveduras associadas às abelhas sem ferrão da Amazônia, (2) contribuiu com os bancos de dados por meio do depósito de sequências nucleotídicas completas de regiões gênicas usadas para identificação de leveduras, (3) estabeleceu 14 novos padrões de RFLP, (4) forneceu quinze linhagens a serem exploradas em estudos futuros, das quais cinco podem ser espécies ainda não descritas na literatura, que visem prospectar processos e biomoléculas de interesse biotecnológico. Native stingless bees (Apidae: Meliponini), as well as the other social insects of the order hymenoptera, present symbiotic interactions with the yeasts, indicated as the main responsible for the processing of pollen, fermented food preferred by the meliponids, and by the fermentation of other vegetal materials taken to these nests. In this project, it was proposed to identify yeasts associated with the nest of two Amazon native bees and establish a reference database for Amazonian strains. For this, the substrates (pollen, honey, larval food and wax) were collected from the nest of Melipona interrupta and Cephalotrigona femorata in three meliponaria, located in Iranduba, Parintins and Paraná de Parintins, (n = 12 samples). The methodological procedures adopted in this work are as follows: (1) isolation in YPD, (2) screening in CHROMágar for separation of the isolates in groups of colors, (3) DNA extraction, (4) screening for RFLP standards based on the amplification of the 18S, ITS1-5,8S-ITS2 and D1 / D2 regions of the 26S rRNA gene and digestion of the amplicon with the Dde I restriction enzyme. The amplicons of the different profiles were sequenced and the identification was achieved comparing the sequences against the nucleotide databases of the INSDC consortium using the BLASTN tool. A total of 749 nest bees associated yeasts were isolated, among these 15 lines were identified, namely: SM01 Candida sp., SM02 Hyphopichia sp., SM03 Rhodotorula sp., SM04 Wickerhamiella versalitis, SM05 Debaryomyces sp., SM06 Candida orthopsilosis, SM07 Candida apícola, SM08 Metschnikowia sp., SM09 Zygosaccharomyces siamensis, SM10 Hanseniaspora opuntiae, SM11 Pichia sp., SM12 Pichia kluyveri, SM13 Trichosporon asahii, SM14 Kodamaea ohmeri and SM15 Aureobasidium sp. This work contributed to (1) the identification of yeast associated to the natives stingless bees, (2) contributed to the databases through the deposit of complete nucleotide sequences, useful for yeast identification, (3) established thirteen new RFLP standards, (4) in addition to compose a database of yeasts, which from this bank, future works may prospect processes and biomolecules of biotechnological interest. CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico 2018-11-21T19:41:17Z 2018-07-25 Dissertação MEIRELES, Sabrina da Fonseca. Leveduras associadas ao ninho das abelhas sem ferrão Melipona interrupta e Cephalotrigona femorata (Apidae: Meliponini): identificação e aspectos biotecnológicos. 2018. 80 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2018. https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6771 por Acesso Aberto application/pdf Universidade Federal do Amazonas Instituto de Ciências Biológicas Brasil UFAM Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia |
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TEDE - Universidade Federal do Amazonas |
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Leveduras Abelhas sem ferrão Perfil de restrição Simbiose Inseto Yeast Stingless bees Restriction profile Symbiosis CIÊNCIAS BIOLÓGICAS Meireles, Sabrina da Fonseca Leveduras associadas ao ninho das abelhas sem ferrão Melipona interrupta e Cephalotrigona femorata (Apidae: Meliponini): identificação e aspectos biotecnológicos |
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As abelhas nativas sem ferrão (Apidae: Meliponini) apresentam interações simbióticas com as
leveduras, apontadas como as principais responsáveis pela fermentação do pólen, alimento
preferido pelos meliponídeos, e pela fermentação de outros materiais de origem vegetal
coletados pelas abelhas. Neste projeto, foi proposto identificar leveduras associadas ao ninho de
duas abelhas nativas da Amazônia e estabelecer um banco de estirpes amazônicas de referência.
Para isso, os substratos (pólen, mel, alimento larval e cera) foram coletados do ninho de
Melipona interrupta e Cephalotrigona femorata em três meliponários, localizados em Iranduba,
Parintins e Paraná de Parintins, (n=12 amostras). Os procedimentos metodológicos adotados
neste trabalho seguem a seguinte ordem: (1) isolamento em YPD, (2) triagem em CHROMágar
para separação dos isolados em grupos de cores, (3) extração de DNA, (4) triagem de padrões
moleculares por PCR/RFLP baseado na amplificação das regiões 18S, ITS1-5,8S-ITS2 e D1/D2
do gene 26S rRNA e digestão do amplicon com a enzima Dde I (5) sequenciamento dos
amplicons dos diferentes padrões obtidos na RFLP e a identificação mediante comparação das
sequências obtidas contra os bancos de dados de sequências nucleotídicas do consórcio INSDC,
com auxílio da ferramenta BLASTN. Foram isoladas 749 leveduras associadas ao ninho das
abelhas Melipona interrupta e Cephalotrigona femorata, das quais, 15 linhagens foram
identificas, a saber: SM01 Candida sp., SM02 Hyphopichia sp., SM03 Rhodotorula sp., SM04
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Candida apícola, SM08 Metschnikowia sp., SM09 Zygosaccharomyces siamensis, SM10
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SM14 Kodamaea ohmeri e SM15 Aureobasidium sp. Este trabalho resultou em (1) dados
inéditos a respeito das leveduras associadas às abelhas sem ferrão da Amazônia, (2) contribuiu
com os bancos de dados por meio do depósito de sequências nucleotídicas completas de regiões
gênicas usadas para identificação de leveduras, (3) estabeleceu 14 novos padrões de RFLP, (4)
forneceu quinze linhagens a serem exploradas em estudos futuros, das quais cinco podem ser
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