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Dissertação
Avaliação da resposta humoral de Tambaqui, Colossoma macropomum infectado pelo acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae
Este estudo avaliou a resposta imune humoral local e sistêmica do Colossoma macropomum à infecção pelo acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae, um parasito recorrente no cultivo de tambaqui que tem ocasionado prejuízos às pisciculturas, especialmente na região Norte do Brasil. Primeiramente, rea...
Autor principal: | Souza, Damy Caroline de Melo |
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Outros Autores: | http://lattes.cnpq.br/9631298512269122, https://orcid.org/0000-0002-3151-7964 |
Grau: | Dissertação |
Idioma: | por |
Publicado em: |
Universidade Federal do Amazonas
2019
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Assuntos: | |
Acesso em linha: |
https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7442 |
Resumo: |
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Este estudo avaliou a resposta imune humoral local e sistêmica do Colossoma macropomum à
infecção pelo acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae, um parasito recorrente no cultivo
de tambaqui que tem ocasionado prejuízos às pisciculturas, especialmente na região Norte do
Brasil. Primeiramente, realizou-se uma revisão de literatura para constatação das principais
respostas nos peixes teleósteos à infecção por parasitos helmintos. Como resultado, observou-se que o aumento do número e tamanho de células produtoras de muco é a resposta mais
comum em quase todas as espécies investigadas. As células rodlets e mastócitos, juntamente
com neutrófilos e macrófagos estão frequentemente associadas com a presença de helmintos
nas mucosas, principalmente intestinal. A participação do sistema imune adaptativo na defesa
e eliminação de helmintos ainda é um campo pouco explorado devido às dificuldades
metodológicas e ao maior enfoque dado ao sistema imune inato dos peixes. Apesar disso, as
novas descobertas caracterizando diferenças nas respostas imunes locais e sistêmicas tem
estimulado novas pesquisas direcionadas ao sistema imune adaptativo dos peixes em
infecções por helmintos. Propôs-se, então, a adaptação de um método já estabelecido para
purificação e isolamento de imunoglobulinas em mamíferos, a fim de facilitar o estudo dessas
moléculas, principalmente em espécies nativas. A purificação de imunoglobulinas da mucosa
intestinal pelo método do ácido caprílico foi realizada em 10 tambaquis infectados e 10
tambaquis não infectados. Isolou-se parcialmente algumas classes de imunoglobulinas, porém
a metodologia ainda precisa ser ajustada para atingir maior grau de pureza, verificada pela
eletroforese SDS-PAGE. Ainda assim, esta técnica mostra-se mais simples e apresenta menor
custo comparada às outras técnicas de purificação comumente utilizadas. No western blot foi
possível detectar imunoglobulinas presentes no muco com anticorpos anti-Ig totais séricos,
indicando a presença de classe (s) similar (es) nos dois fluidos corpóreos do tambaqui. A
infecção pelo acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae resultou na maior expressão de
imunoglobulinas no muco intestinal, apresentado maior títulos de imunoglobulinas nos
animais infectados. Em um segundo experimento, 10 tambaquis infectados e 10 tambaquis
não infectados em duas classes de peso diferentes foram separados, coletando-se soro e muco
intestinal para a avaliação de componentes da resposta imune inata e adaptativa. A
imunohistoquímica do intestino de tambaqui infectados e não infectados foi realizada a fim de
confirmar a presença das imunoglobulinas na mucosa intestinal e a interação dessas moléculas
com o acantocéfalo. Foi observado o aumento dos títulos de imunoglobulinas totais e
fosfatase alcalina no soro, assim como dos níveis de proteínas totais no soro e no muco, e a
diminuição dos títulos de imunoglobulinas e fosfatase alcalina no muco intestinal dos animais
infectados. A presença de imunoglobulinas em células presentes na lâmina própria de animais
não infectados, no muco intestinal e em contato direto com a superfície do parasito nos
animais infectados foi revelada pela imunohistoquímica. Assim, nas infecções por
acantocéfalos, observa-se respostas locais e sistêmicas do sistema imune do tambaqui,
evidenciando a importância do muco para avaliação de alterações locais e do soro para avaliar
o estado de saúde do peixe. |