Produção e purificação de lipopeptídeos bioativos produzidos por bactérias endofíticas de plantas da região Amazônica

Mesquita, Adriana Spirotto Stein; http://lattes.cnpq.br/1909417134212695

Tese

Produção e purificação de lipopeptídeos bioativos produzidos por bactérias endofíticas de plantas da região Amazônica

O gênero Bacillus possui uma grande variedade de espécies produtoras de metabólitos secundários bioativos com grande potencial em diferentes campos, entre estes os lipopeptídeos, que são compostos anfifílicos com atividades antifúngica, antibiótica e surfactantes. No presente trabalho foram utilizad...

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Autor principal:	Mesquita, Adriana Spirotto Stein
Outros Autores:	http://lattes.cnpq.br/1909417134212695
Grau:	Tese
Idioma:	por
Publicado em:	Universidade Federal do Amazonas 2020
Assuntos:	Espectrometria de massa Iturina Metabólitos secundários bioativos Compostos anfifílicos Atividade surfactante CIÊNCIAS EXATAS E DA TERRA Lipopeptídeos Bactérias endofíticas Espectrometria de massas B. amyloliquefaciens
Acesso em linha:	https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8026

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spelling	oai:https:--tede.ufam.edu.br-handle-:tede-80262020-12-02T05:03:53Z Produção e purificação de lipopeptídeos bioativos produzidos por bactérias endofíticas de plantas da região Amazônica Mesquita, Adriana Spirotto Stein Souza, Afonso Duarte Leão de http://lattes.cnpq.br/1909417134212695 http://lattes.cnpq.br/5784405197320526 Pinheiro, Maria Lúcia Belém http://lattes.cnpq.br/9299061381457390 Souza, João Vicente Braga de http://lattes.cnpq.br/7804981785557071 Takahashi, Jacqueline Aparecida http://lattes.cnpq.br/8436025963943451 Espectrometria de massa Iturina Metabólitos secundários bioativos Compostos anfifílicos Atividade surfactante CIÊNCIAS EXATAS E DA TERRA Lipopeptídeos Bactérias endofíticas Espectrometria de massas B. amyloliquefaciens O gênero Bacillus possui uma grande variedade de espécies produtoras de metabólitos secundários bioativos com grande potencial em diferentes campos, entre estes os lipopeptídeos, que são compostos anfifílicos com atividades antifúngica, antibiótica e surfactantes. No presente trabalho foram utilizadas três linhagens de bactérias endofíticas de plantas da Amazonia produtoras de lipopeptídeos, identificadas por sequenciamento de 16S rDNA como B. amyloliquefaciens. Os dados de espectrometria de massas dos extratos das três linhagens analisadas indicaram a presença dos lipopeptídeos iturina, surfactina e fengicina. Na avaliação do rendimento na produção de lipopeptídeos a partir de diferentes meios de cultivo, o YM apresentou os melhores resultados, tendo a linhagem de B. amyloliquefaciens PpC1 2.2b o maior rendimento com 633,1 mg. L-1. A otimização da produção de lipopeptídeos para as linhagens de B. amyloliquefaciens PpC1 2.2b, GhcC1 2.1a e DgcR2 1.1b por planejamento fatorial fracionado 24-1 e dados obtidos da ANOVA permitiram propor um modelo eficaz obtendo um aumento significativo da produção de lipopeptídeos a partir de variações de pH, agitação e aeração. A partir das análises de LC-ESI-MS/MS e RMN dos isolados de PpC1 2.2b foram identificadas dezessete substâncias lipopeptídicas incluindo seis homólogos da iturina A, sete homólogos da surfactina A, dois homólogos da fengicina A e dois da fengicina B. As frações de surfactinas, iturinas e fengicinas apresentaram atividades anti-inflamatórias por inibição da produção de NO em células de macrófagos murinos J774A.1 com viabilidade celular acima de 100%. As amostras LP196, Fengicina AB1 e Iturina A2 apresentaram atividade antiplasmódica contra P. falcipurum FCR3, exibindo CI50 de, 58,52 µg mL-1, 58,0 µg.mL-1 e 66,83 µg.mL-1 e o extrato LP164 apresentou atividade antibacterina contra K. pneumoniae com MIC de 62,5 µg.mL-1. The Bacillus genus has a wide variety of species that produce bioactive secondary metabolites with great potential in different fields, including lipopeptides, which are amphiphilic compounds with antifungal, antibiotic and surfactant activities. In the present work, three strains of endophytic bacteria from Amazonian plants producing lipopeptides used, identified by sequencing 16S rDNA as B. amyloliquefaciens. The mass spectrometry data of the extracts of the three strains analyzed indicated the presence of the lipopeptides iturin, surfactin and fengycin. In the evaluation of the yield in the production of lipopeptides from different culture media, YM presented the best results, with the B. amyloliquefaciens PpC12.2b strain having the highest yield, 633.1 mg. L-1. The optimization of lipopeptide production for B. amyloliquefaciens PpC1 2.2b, GhcC1 2.1a and DgcR2 1.1b lines by fractional factorial planning 24-1 and data obtained from ANOVA allowed us to propose an effective model for increasing lipopeptide production from pH variations, agitation and aeration. From the LC-ESI-MS / MS and NMR analyzes of the PpC12.2b isolates, seventeen lipopeptide substances were identified, including six iturin A homologues, seven surfactin A homologues, two fengycin A homologues and two fengycin B. Fractions of surfactins, iturins and fengycin showed anti-inflammatory activities by inhibiting the production of NO in cells of murine macrophages J774A.1 with cell viability above 100%. Samples LP196, Fengycin AB1 and Iturin A2 showed antiplasmodic activity against P. falcipurum FCR3, exhibiting IC50 of 58.0 µg.mL-1, 58.52 µg.mL-1 and 66.83 µg.mL-1 and the LP164 extract showed activity antibacterine against K. pneumoniae with MIC of 62.5 µg.mL-1. CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior 2020-12-01T16:21:38Z 2020-09-15 Tese MESQUITA, Adriana Spirotto Stein. Produção e purificação de lipopeptídeos bioativos produzidos por bactérias endofíticas de plantas da região Amazônica. 2020. 269 f. Tese (Doutorado em Química) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2020. https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8026 por Acesso Aberto http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ application/pdf Universidade Federal do Amazonas Instituto de Ciências Exatas Brasil UFAM Programa de Pós-graduação em Química
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