Caracterização bioquímica e funcional de lectinas Tipo C de venenos de serpentes do gênero Bothrops

Dissertação de mestrado apresentada ao Programa de Pós Graduação em Biologia Experimental – PGBIOEXP da Universidade Federal de Rondônia - UNIR como requisito para a obtenção do título de Mestre em Biologia Experimental. Orientador: Dr. Leonardo de A. Calderon

Autor principal: Oliveira, Cláudia Siqueira de
Outros Autores: Calderon, Leonardo de Azevedo
Publicado em: 2017
Assuntos:
Lectinas tipo-C
Gênero Bothrops
Caracterização
Acesso em linha: http://www.ri.unir.br/jspui/handle/123456789/1701
id oai:localhost:123456789-1701
recordtype dspace
spelling oai:localhost:123456789-17012018-10-29T19:10:55Z Caracterização bioquímica e funcional de lectinas Tipo C de venenos de serpentes do gênero Bothrops Oliveira, Cláudia Siqueira de Calderon, Leonardo de Azevedo Lectinas tipo-C Gênero Bothrops Caracterização Dissertação de mestrado apresentada ao Programa de Pós Graduação em Biologia Experimental – PGBIOEXP da Universidade Federal de Rondônia - UNIR como requisito para a obtenção do título de Mestre em Biologia Experimental. Orientador: Dr. Leonardo de A. Calderon As lectinas de venenos ofídicos pertencem a um grupo de proteínas não enzimáticas, de origem não imunológica, com capacidade de aglutinar células, interagindo de maneira reversível e não-covalente com polissacarídeos, glicoconjugados livres ou ligados à superfícies celulares. O presente estudo teve como objetivo caracterizar lectinas tipo C de venenos de serpentes do gênero Bothrops e compará-las quanto aos seus aspectos físico-químicos e biológicos. O trabalho foi realizado em etapas: (1) seleção de amostras, (2) isolamento e caracterização bioquímica, (3) caracterização estrutural e (4) caracterização funcional. Para a seleção, utilizou-se um lote com diferentes espécies botrópicos, selecionando-se aquelas que se mostraram ativas quanto à atividade hemaglutinante e foram inibidas por lactose. Os venenos selecionados foram submetidos a cromatografia de afinidade em coluna de agarose-lactose. Nas condições experimentais, quatro apresentaram frações contendo lectina. Estas frações foram posteriormente aplicadas em coluna de fase reversa (Discovery - C18), para uma completa purificação, resultando em cinco lectinas isoladas: BaLec - lectina de B. asper; BjL-lectina de B. jararaca; BjcuL - lectina de B. jararacussu, BlL - lectina de B. leucurus e BmL – lectina de B. mattogrossensis. Essas proteínas apresentaram perfis de migração semelhantes quando submetidos a SDS-PAGE, sendo evidente seu caráter dimerico, unidos por pontes dissulfeto. A massa molecular definida por espectrometria de massa também foi similar para todas as lectinas isoladas. O sequenciamento N-terminal por degradação de Edman, identificou os primeiros 26 resíduos de aminoácidos de BlL e os 54 de BaLec. O alinhamento múltiplo evidenciou elevada identidade quando comparadas com lectinas isoladas de outros venenos botrópicos. Todas as lectinas isoladas são dependentes de íon Ca2+ e perdem atividade na presença de agentes redutores. No contexto geral, considerando as informações experimentais obtidas, foram purificadas cinco Lectinas tipo C, com afinidade por galactosídeos. Este é o primeiro relato da sequência amino terminal da BlL, bem como a primeira descrição de lectina tipo C isolada do veneno de B. asper e B. mattogrossensis. 2017-07-12T18:02:36Z 2017-07-12T18:02:36Z 2015 OLIVEIRA, Cláudia Siqueira de. Caracterização bioquímica e funcional de lectinas Tipo C de venenos de serpentes do gênero Bothrops. 2015. 70 f. Dissertação (Mestrado) - Programa de Pós - Graduação em Biologia Experimental, Fundação Universidade Federal de Rondônia, Porto Velho, RO. http://www.ri.unir.br/jspui/handle/123456789/1701
institution Repositório Institucional - Universidade Federal de Rondônia
collection RepositorioUNIR
topic Lectinas tipo-C
Gênero Bothrops
Caracterização
spellingShingle Lectinas tipo-C
Gênero Bothrops
Caracterização
Oliveira, Cláudia Siqueira de
Caracterização bioquímica e funcional de lectinas Tipo C de venenos de serpentes do gênero Bothrops
topic_facet Lectinas tipo-C
Gênero Bothrops
Caracterização
description Dissertação de mestrado apresentada ao Programa de Pós Graduação em Biologia Experimental – PGBIOEXP da Universidade Federal de Rondônia - UNIR como requisito para a obtenção do título de Mestre em Biologia Experimental. Orientador: Dr. Leonardo de A. Calderon
author Oliveira, Cláudia Siqueira de
author2 Calderon, Leonardo de Azevedo
author2Str Calderon, Leonardo de Azevedo
title Caracterização bioquímica e funcional de lectinas Tipo C de venenos de serpentes do gênero Bothrops
title_short Caracterização bioquímica e funcional de lectinas Tipo C de venenos de serpentes do gênero Bothrops
title_full Caracterização bioquímica e funcional de lectinas Tipo C de venenos de serpentes do gênero Bothrops
title_fullStr Caracterização bioquímica e funcional de lectinas Tipo C de venenos de serpentes do gênero Bothrops
title_full_unstemmed Caracterização bioquímica e funcional de lectinas Tipo C de venenos de serpentes do gênero Bothrops
title_sort caracterização bioquímica e funcional de lectinas tipo c de venenos de serpentes do gênero bothrops
publishDate 2017
url http://www.ri.unir.br/jspui/handle/123456789/1701
_version_ 1787136548539465728
score 11.755432

Registros relacionados