Investiga??o da ocorr?ncia do v?rus Influenza C em um segmento populacional da regi?o metropolitana de Bel?m, Par?
INTRODU??O Os v?rus Influenza pertencem ? fam?lia Orthomyxoviridae e subdividem-se em tr?s g?neros: Influenzavirus A, Influenzavirus B e Influenzavirus C. Atualmente a aten??o dos ?rg?os respons?veis pela vigil?ncia em sa?de, quando se trata de Influenza, ? destinada exclusivamente aos v?rus Infl...
| Autor principal: | Pinho, Raimundo Adalberto Pacheco de |
|---|---|
| Grau: | Dissertação |
| Idioma: | por |
| Publicado em: |
Instituto Evandro Chagas
2018
|
| Assuntos: | |
| Acesso em linha: |
http://patua.iec.gov.br//handle/iec/3113 |
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ir-iec-3113 |
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ir-iec-31132019-05-30T19:37:21Z Investiga??o da ocorr?ncia do v?rus Influenza C em um segmento populacional da regi?o metropolitana de Bel?m, Par? Pinho, Raimundo Adalberto Pacheco de Sousa, Rita Catarina Medeiros de Santos, Mirleide Cordeiro dos Machado, Luiz Fernando Almeida Mascarenhas, Joana D'Arc Pereira Resque, Hugo Reis Soares, Luana da Silva Influenza Humana / diagn?stico V?rus da Influenza A / patogenicidade V?rus da Influenza B / patogenicidade Genoma Viral Influenzavirus C / isolamento & purifica??o INTRODU??O Os v?rus Influenza pertencem ? fam?lia Orthomyxoviridae e subdividem-se em tr?s g?neros: Influenzavirus A, Influenzavirus B e Influenzavirus C. Atualmente a aten??o dos ?rg?os respons?veis pela vigil?ncia em sa?de, quando se trata de Influenza, ? destinada exclusivamente aos v?rus Influenza dos g?neros A e B, pela maior gravidade dos seus sintomas e suas caracter?sticas epidemiol?gicas. Contudo, estudos mais recentes t?m revelado a import?ncia das infec??es causadas pelos V?rus influenza C. A epidemiologia do g?nero Influenzavirus C, at? ent?o associada a quadros brandos e assintom?ticos de infec??o respirat?ria, carece de dados que elucidem sua sintomatologia e sazonalidade. Diferente dos V?rus influenza A e B, a detec??o deste agente infeccioso n?o est? inclu?da na rotina de diagn?stico dos laborat?rios de sa?de p?blica, ocasionando assim, um subdiagn?stico. OBJETIVO Investigar a ocorr?ncia do V?rus influenza C em pacientes com IRA em um segmento populacional e compreender sua sazonalidade na regi?o metropolitana de Bel?m. MATERIAL E M?TODOS Baseado no GenBank, foi constru?do um fragmento sint?tico de DNA (gBblock-FluC) do gene M do V?rus influenza C. Este fragmento foi clonado utilizando. O cDNA, proveniente da clonagem, foi submetido ? rea??o de transcri??o in vitro utilizando o Kit MEGAscript SP6 (Invitrogen - Thermo Scientific) ou alternativamente o kit MEGAscript T7 (Invitrogen- Thermo Scientific) para produ??o do RNA alvo, que foi quantificado, sendo utilizado como controle positivo, ap?s a realiza??o de uma curva de dilui??es seriadas (log10). A popula??o de estudo compreendeu 274 indiv?duos de ambos os sexos em diferentes faixas et?rias, com queixas sugestivas de infec??o respirat?ria aguda, provenientes de servi?os de sa?de da regi?o metropolitana de Bel?m. O RNA viral foi extra?do a partir do esp?cime cl?nico utilizando-se o kit High Pure Viral nucleic acid kit (Roche, Indianapolis, USA), seguindo as orienta??es do fabricante. A detec??o do genoma viral foi realizada atrav?s RTqPCR de acordo com protocolo j? padronizado. Foram utilizados detectores (iniciadores e sonda) espec?ficos para o gene M do V?rus nfluenza C e para o gene da RNAseP humana (RNP). O controle positivo (RNA sint?tico de influenza C) e os negativos (?gua livre de DNAse e RNAse) foram inclu?dos em cada rea??o. A rea??o foi realizada no termociclador 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems - Thermo Scientific), com o kit comercial GoTaq Probe 1-Step RT-qPCR System (Promega). RESULTADOS O genoma viral foi detectado em 0,36% (1/274) das amostras analisadas. O esp?cime positivo foi proveniente de um paciente do sexo feminino, 22 anos de idade, a qual se encontrava no 3? trimestre gestacional. Os sintomas principais foram dispneia, acompanhada de febre, tosse, mialgia, desconforto respirat?rio, coriza, cafaleia, congest?o nasal e afirmou ser portadora de bronquite asm?tica. Este achado evidencia a circula??o do V?rus influenza C no Brasil. 2018-03-29T15:06:04Z 2018-03-29T15:06:04Z 2016 Disserta??o PINHO, Raimundo Adalberto Pacheco de. Investiga??o da ocorr?ncia do v?rus Influenza C em um segmento populacional da regi?o metropolitana de Bel?m, Par?. 53 f. Disserta??o (Mestrado em Virologia) - Instituto Evandro Chagas, Programa de P?s-Gradua??o em Virologia, Ananindeua, 2016. http://patua.iec.gov.br//handle/iec/3113 por Acesso Aberto application/pdf Instituto Evandro Chagas |
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Instituto Evandro Chagas (IEC) |
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em tr?s g?neros: Influenzavirus A, Influenzavirus B e Influenzavirus C. Atualmente a aten??o
dos ?rg?os respons?veis pela vigil?ncia em sa?de, quando se trata de Influenza, ? destinada
exclusivamente aos v?rus Influenza dos g?neros A e B, pela maior gravidade dos seus
sintomas e suas caracter?sticas epidemiol?gicas. Contudo, estudos mais recentes t?m revelado
a import?ncia das infec??es causadas pelos V?rus influenza C. A epidemiologia do g?nero
Influenzavirus C, at? ent?o associada a quadros brandos e assintom?ticos de infec??o
respirat?ria, carece de dados que elucidem sua sintomatologia e sazonalidade. Diferente dos
V?rus influenza A e B, a detec??o deste agente infeccioso n?o est? inclu?da na rotina de
diagn?stico dos laborat?rios de sa?de p?blica, ocasionando assim, um subdiagn?stico.
OBJETIVO Investigar a ocorr?ncia do V?rus influenza C em pacientes com IRA em um
segmento populacional e compreender sua sazonalidade na regi?o metropolitana de Bel?m.
MATERIAL E M?TODOS Baseado no GenBank, foi constru?do um fragmento sint?tico de
DNA (gBblock-FluC) do gene M do V?rus influenza C. Este fragmento foi clonado utilizando.
O cDNA, proveniente da clonagem, foi submetido ? rea??o de transcri??o in vitro utilizando o
Kit MEGAscript SP6 (Invitrogen - Thermo Scientific) ou alternativamente o kit MEGAscript
T7 (Invitrogen- Thermo Scientific) para produ??o do RNA alvo, que foi quantificado, sendo
utilizado como controle positivo, ap?s a realiza??o de uma curva de dilui??es seriadas
(log10). A popula??o de estudo compreendeu 274 indiv?duos de ambos os sexos em diferentes
faixas et?rias, com queixas sugestivas de infec??o respirat?ria aguda, provenientes de servi?os
de sa?de da regi?o metropolitana de Bel?m. O RNA viral foi extra?do a partir do esp?cime
cl?nico utilizando-se o kit High Pure Viral nucleic acid kit (Roche, Indianapolis, USA),
seguindo as orienta??es do fabricante. A detec??o do genoma viral foi realizada atrav?s RTqPCR
de acordo com protocolo j? padronizado. Foram utilizados detectores (iniciadores e
sonda) espec?ficos para o gene M do V?rus nfluenza C e para o gene da RNAseP humana
(RNP). O controle positivo (RNA sint?tico de influenza C) e os negativos (?gua livre de
DNAse e RNAse) foram inclu?dos em cada rea??o. A rea??o foi realizada no termociclador
7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems - Thermo Scientific), com o kit comercial GoTaq
Probe 1-Step RT-qPCR System (Promega). RESULTADOS O genoma viral foi detectado em
0,36% (1/274) das amostras analisadas. O esp?cime positivo foi proveniente de um paciente
do sexo feminino, 22 anos de idade, a qual se encontrava no 3? trimestre gestacional. Os
sintomas principais foram dispneia, acompanhada de febre, tosse, mialgia, desconforto
respirat?rio, coriza, cafaleia, congest?o nasal e afirmou ser portadora de bronquite asm?tica.
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