Dissertação

Detec??o e genotipagem de norov?rus em sangue e fezes de crian?as hospitalizadas com quadro de gastrenterite em Bel?m, Par?, Brasil

Resumo: As doen?as diarr?icas agudas acometem anualmente milh?es de indiv?duos e ainda constituem uma das cinco principais causas de morte entre crian?as menores de cinco anos. A gastrenterite aguda (GA) possui diversos agentes etiol?gicos, entretanto, recentemente os v?rus v?m sendo identificado...

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Autor principal: Reym?o, Tammy Kathlyn Amaral
Grau: Dissertação
Idioma: por
Publicado em: Instituto Evandro Chagas 2018
Assuntos:
Acesso em linha: http://patua.iec.gov.br//handle/iec/3118
Resumo:
Resumo: As doen?as diarr?icas agudas acometem anualmente milh?es de indiv?duos e ainda constituem uma das cinco principais causas de morte entre crian?as menores de cinco anos. A gastrenterite aguda (GA) possui diversos agentes etiol?gicos, entretanto, recentemente os v?rus v?m sendo identificados como respons?veis por cerca de 70% do total de casos. Dentre estes, destaca-se o norov?rus (NoV), um dos principais respons?veis por casos espor?dicos e surtos de GA. Este v?rus ? normalmente excretado nas fezes dos pacientes, em grande quantidade, o que facilita sua dissemina??o e novas contamina??es. Mais recentemente o NoV foi detectado tamb?m no soro de pacientes com sintomas extra-intestinais, como: coagula??o intravascular disseminada, enterocolite necrosante e convuls?es. Logo, o objetivo desta pesquisa foi investigar a presen?a de NoV no soro de crian?as hospitalizadas com quadro de GA que apresentavam o v?rus nas fezes e correlacionar este achado com o quadro cl?nico apresentado pelo paciente. De mar?o/2012 a junho/2015, foram obtidos dados cl?nicos e amostras de fezes/ soro de crian?as com at? nove anos de idade, hospitalizadas por GA em duas cl?nicas pedi?tricas de Bel?m, Par?, Brasil. Para a detec??o de NoV nas amostras fecais utilizou-se o ensaio imunoenzim?tico (EIE) (kit RIDASCREEN?), e no soro a t?cnica de rea??o em cadeia da polimerase quantitativa precedida de transcri??o reversa (RT-qPCR), sistema TaqMan, iniciadores COG2F e COG2R, sonda RING-2 e uma curva-padr?o plasmidial. As amostras positivas foram submetidas ? rea??o em cadeia da polimerase precedida de transcri??o reversa (RT-PCR) com iniciadores espec?ficos para a regi?o do caps?deo ou da jun??o entre a polimerase e o caps?deo, visando o sequenciamento parcial do genoma viral. Amostras com suspeita de recombina??o foram analisadas por meio do programa Simplot. Os dados cl?nicos foram tratados estatisticamente, utilizando os testes do qui-quadrado e de Mann-whitney. Uma positividade de 24,3% (108/445) foi obtida para NoV nas amostras fecais, dentre as quais 20,4% (22/108) tamb?m foram positivas nos soros. A carga viral fecal foi maior no grupo de crian?as que tamb?m apresentou o v?rus no soro em compara??o ao que tinha o v?rus apenas nas fezes (p<0,0001), sendo este mesmo padr?o observado com rela??o ao tempo de hospitaliza??o (p= 0,0252). A faixa et?ria de 0 a 36 meses foi a mais acometida por NoV em rela??o as fezes, enquanto que no soro foi entre >6 at? 24 meses, havendo diminui??o no n?mero de casos em ambos os grupos conforme o aumento da idade (p=0,0059; p=0,0211). Foram encontrados nove diferentes gen?tipos do genogrupo GII sendo deles tr?s cepas recombinantes (GII.2, GII.4, GII.6, GII.7, GII.8, GII.17, GII.P6/GII.7, GII.P22/GII.5 e GII.P13/GII.17) e dois do genogrupo GI, sendo um recombinante (GI.2 e GI.Pb/GI.6). O GII.4 variante Sydney foi o prevalente. Nesses tr?s anos de pesquisa, verificou-se que os NoV foram respons?veis por quase 1/4 dos casos de GA entre as crian?as hospitalizadas, dentre as quais a circula??o do RNA viral nos soros foi expressiva, considerando outros estudos j? realizados, e influenciou o tempo de hospitaliza??o destas crian?as. Al?m disso, observou-se ampla diversidade gen?tica, o que contribui para estudos futuros visando uma vacina preventiva.