Tese

Rela??o in vitro do citomegalov?rus com receptor do fator de crescimento epid?rmico (EGFR) em c?lulas de gl?ndula salivar humana

O citomegalov?rus humano (HHCMV) ? um herpesv?rus humano que infecta uma variedade de tipos celulares sugerindo que o mesmo utilize m?ltiplos receptores para a entrada na c?lula hospedeira, a exemplo do receptor do fator de crescimento epid?rmico (EGFR). Esse receptor quando sobreexpresso desempenha...

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Autor principal: Falc?o, Aline Semblano Carreira
Grau: Tese
Idioma: por
Publicado em: MS/SVS/Instituto Evandro Chagas 2018
Assuntos:
Acesso em linha: http://patua.iec.gov.br//handle/iec/3539
Resumo:
O citomegalov?rus humano (HHCMV) ? um herpesv?rus humano que infecta uma variedade de tipos celulares sugerindo que o mesmo utilize m?ltiplos receptores para a entrada na c?lula hospedeira, a exemplo do receptor do fator de crescimento epid?rmico (EGFR). Esse receptor quando sobreexpresso desempenha um importante papel no desenvolvimento de c?nceres. A fun??o desregulada do EGFR pode ser resultado tamb?m de uma muta??o, a mais comum ? o EGFRvIIII, ou ativa??o aut?crina a partir da superprodu??o de ligantes, os quais podem induzir a secre??o de metaloproteinases da matriz (MMPs), que s?o enzimas proteol?ticas facilitadoras dos mecanismos de invas?o tumoral e met?stases. Estudos mostram que a ativa??o da via de sinaliza??o do EGFR pelo HCMV tem sido associada a etiologia e patog?nese de tumor nas gl?ndulas salivares. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar a poss?vel rela??o entre o HCMV e o EGFR em c?lulas de gl?ndula salivar humana, in vitro, a fim de melhor compreender a patogenia de neoplasias possivelmente induzidas pelo HCMV. Para isso, foi utilizada uma linhagem celular derivada de gl?ndula salivar humana (c?lulas HSG) e antes da inocula??o do HCMV, as c?lulas HSG foram submetidas ? t?cnica de imunofluoresc?ncia para detectar a express?o das prote?nas: EGF, EGFR, EGFRvIII, MMP-2 e MMP-9. Meios condicionados com diferentes concentra??es de EGF foram submetidos a t?cnica de zimografia para avaliar a secre??o de proteases. Posteriormente, as c?lulas HSG foram inoculadas com a cepa AD169 e a observa??o do efeito citop?tico foi realizada em diferentes momentos p?s-infec??o. Os meios condicionados das c?lulas infectadas foram examinados por zimografia. E pela t?cnica de western blot avaliou-se a rela??o do HCMV com o EGFR nas c?lulas HSG. Antes da inocula??o do HCMV, as c?lulas HSG expressaram EGF, EGFR, EGFRvIII, MMP-2 e MMP-9. Diferentes concentra??es de EGF induziram um aumento na secre??o de MMP-2 e MMP-9. As c?lulas HSG inoculadas com a cepa AD169 apresentaram efeito citop?tico com sete dias de inocula??o e os meios condicionadas dessas c?lulas infectadas mostraram um aumento significativo na express?o de MMP-2 e MMP-9. Por western blot, verificou-se a fosforila??o do receptor EGFR (pEGFR) e um aumento na express?o do EGFRvIII. Esses dados sugerem que o EGFR pode ser um receptor para o HCMV nas c?lulas HSG e que o aumento na express?o do EGFRvIII, bem como das MMPs, nas c?lulas infectadas poderia ser um dos mecanismos pelo qual o HCMV promoveria o desenvolvimento de tumores nas gl?ndulas salivares.