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Dissertação
Produção de antígenos recombinantes de regiões polimórficas e conservada da “proteína 1” de superfície de merozoíto de plasmodium vivax e caracterização da resposta imune humoral em indivíduos expostos a malária no Amazonas
Introdução: A malária é um problema de saúde pública amplamente distribuída nas regiões tropicais e subtropicais no mundo. No Brasil, a doença ainda apresenta elevados números de casos, no qual o Plasmodium vivax (P. vivax) é responsável pela maior parte de diagnóstico. Nos últimos anos, esses ca...
Autor principal: | Almeida, Maria Edilene Martins de. |
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Outros Autores: | http://lattes.cnpq.br/9637683978812335 |
Grau: | Dissertação |
Idioma: | por |
Publicado em: |
Universidade Federal do Amazonas
2016
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Assuntos: | |
Acesso em linha: |
http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5192 |
Resumo: |
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Introdução: A malária é um problema de saúde pública amplamente distribuída nas
regiões tropicais e subtropicais no mundo. No Brasil, a doença ainda apresenta
elevados números de casos, no qual o Plasmodium vivax (P. vivax) é responsável
pela maior parte de diagnóstico. Nos últimos anos, esses casos vêm se
apresentando de forma complicada, tornando-se este um motivo de preocupação,
pois está espécie apresenta ampla distribuição geográfica, dessa maneira torna-se
necessário o controle da infecção. Uma das alternativas para controle da infecção
seria o desenvolvimento de uma vacina. No entanto, um dos grandes problemas
para seu desenvolvimento é a incompreensão das respostas imunológicas contra os
antígenos candidatos. Dentre os antígenos candidatos, a “proteína 1” de superfície
do merozoíto (MSP-1) de Plasmodium tem se destacado, pois estudos demonstram
que anticorpos contra as diferentes regiões de MSP-1 conferem proteção clínica em
indivíduos que residem em áreas endêmicas. O objetivo desta trabalho foi
caracterizar a resposta imune humoral contra antígenos recombinantes de regiões
variavéis e conservada da PvMSP-1 em indivíduos que residem em áreas
endemicas no estado do Amazonas. Material e métodos: Para tanto, foram
produzidas três proteínas recombinantes, duas correspondente a região variável
(bloco 2) e uma da conservada (bloco do ICB1) da PvMSP-1 (utilizando sequencias
identificadas em trabalhadores anteriores, e selecionadas por bioinformática como
os epítopos de células B). Tais proteínas foram expressas e purificadas utilizando
genes sintéticos otimizados para expressão em Escherichia coli. A reatividade de
soros de pacientes sintomáticos e assintomáticos contra estas proteínas, juntamente
com a proteína ICB2-5 de PvMSP-1 (obtida em trabalhos anteriores), foi avaliada por
ELISA indireto. Resultados e Conclusão: A expressão e purificação das proteínas
recombinantes foram realizadas com êxito. A análise sorológica contra os antígenos
recombinantes demonstrou maior nível de anticorpos contra a proteína ICB2-5 para
ambas as aéreas (Rio Pardo e Manaus). Em relação à resposta de anticorpos IgG
contra às três proteínas (P1, P2 e P3), foi observado que a proteína P2 foi a mais
reconhecida nos soros de pacientes sintomáticos de Manaus e Rio Pardo, enquanto
que a P3 foi a mais reconhecida nos assintomáticos. Em análise a resposta de
subclasses observou-se que o IgG3 foi o mais prevalente contra ICB2-5. Em relação
às três proteínas o nível de reatividade foi baixo para as subclasses, porém quando
as frequências de soros respondedores IgG3 e IgG2 foram reunidas in silico(ICB2-
5+P1+P2+P3). Estas superaram os resultados nos níveis de reconhecimento da
ICB2-5 sozinha, sugerindo que o desenvolvimento de um repertório de proteínas
recombinantes correspondentes ao Bloco 2 é capaz de expandir o espectro de soros
reagentes. |