Lacases são enzimas oxidativas com grande aplicação industrial e biotecnológica. Essas enzimas são utilizadas em uma ampla gama de processos, a exemplo de biorremediação, produção de bebidas, análise de drogas, entre outros. Os fungos degradadores de madeira (FDM) são os maiores produtores de lacases da natureza. Este grupo de microrganismos utiliza essas enzimas para degradar a lignina presente nas fibras vegetais e ter acesso aos carboidratos retidos no seu interior. Na floresta amazônica, os FDM são muitos, mas ainda pouco estudados. Dessa forma, faz-se necessário a investigação da biodiversidade desses organismos de modo a ter acesso ao seu potencial para a produção dessa importante enzima. Sendo assim, o presente projeto objetiva isolar e selecionar FDM produtores de lacases a partir da mata nativa, bem como optimizar a produção in vitro dessas enzimas desenvolvendo meios de cultura que estimulem sua produção. Os fungos serão isolados a partir de corpos de frutificação coletados em troncos de árvores em degradação. Os basidiocarpos serão transportados para o laboratório de microbiologia, onde se dará a o isolamento. O isolamento será feito utilizando fragmentos do basiciocarpos coletados assepticamente com bisturi e pinça esterilizados, e submetendo-os a um processo de desinfecção superficial com álcool, água sanitária e água destilada estéril. Os fragmentos obtidos serão plaqueados em meio de cultura contendo antibióticos para inibir o crescimento de bactérias. Após a obtenção das culturas puras os fungos serão repicados para meios de cultura contendo um corante (RBBR) cuja degradação indicará que os organismo é produtor de lacases (ensaio qualitativo). Os fungos produtores dessas enzimas serão cultivados em meio líquido cujo extrato será utilizado em ensaios enzimáticos de modo a determinar a quantidade de enzima produzida pelo fungo (Unidades Internacionais / mL de extrato; ensaio quantitativo). Será utilizado um fungo da espécie Trametes versicolor que servirá como padrão de comparação com as espécies obtidas. Utilizando o fungo obtido que apresentou a maior produção das enzimas, serão testados diferentes meios de cultura de modo a aumentar a produção. Os parâmetros avaliados serão: concentração de cobre e de nitrogênio.
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