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Relatório de Pesquisa
Estudo comparativo de procedimentos metodológicos para isolamento e recuperação de DNA de fungos dermatófitos
Os dermatófitos constituem um grupo de fungos filamentosos queratinofílicos capazes de parasitar os tecidos queratinizados do homem e de animais como a pele, pêlos e unhas, causando micoses denominadas de dermatofitoses ou tinhas . Estas infecções possuem distribuição universal, com elevada prevalê...
Autor principal: | Karoline Lô Jimenez |
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Grau: | Relatório de Pesquisa |
Idioma: | pt_BR |
Publicado em: |
Universidade Federal do Amazonas
2016
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Assuntos: | |
Acesso em linha: |
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oai:localhost:prefix-29042021-11-10T14:49:50Z Estudo comparativo de procedimentos metodológicos para isolamento e recuperação de DNA de fungos dermatófitos Karoline Lô Jimenez Maria Zeli Moreira Frota Debora Cristina de Lima Fernandes dermatofitos extraçao DNA CIÊNCIAS DA SAÚDE: FARMÁCIA Os dermatófitos constituem um grupo de fungos filamentosos queratinofílicos capazes de parasitar os tecidos queratinizados do homem e de animais como a pele, pêlos e unhas, causando micoses denominadas de dermatofitoses ou tinhas . Estas infecções possuem distribuição universal, com elevada prevalência na maioria das regiões do mundo, embora exista ampla variação na incidência das diferentes espécies dermatofíticas. As tinhas incluem uma variedade de manifestações clínicas que podem acometer indivíduos de ambos os sexos e de todas as faixas etárias, sendo consideradas um problema em saúde pública (LOPES, 1999; SIDRIM. 2004; LACAZ, 2005; REZENDE et al, 2008). Os métodos laboratoriais convencionais de diagnóstico micológico baseiam-se principalmente nas características morfológicas do fungo, e, nem sempre permitem uma clara definição do agente etiológico em nível de espécie, além de exigir um tempo relativamente longo e uma equipe técnica especializada para os estudos da macro e micromorfologia das colônias. Diante disto, as ferramentas de biologia molecular, em especial a técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) apresenta-se como uma alternativa muito promissora para maior rapidez e eficiência no diagnóstico das dermatofitoses. No entanto, uma etapa fundamental para a obtenção de bons resultados nos protocolos de amplificação de DNA, refere-se ao isolamento e a purificação do mesmo, e no que diz respeito aos fungos, é de fundamental importância considerar que a grande variabilidade morfológica encontrada entre as diferentes espécies fúngicas pode interferir na qualidade e no rendimento do DNA extraído. Diferentes protocolos para a extração de DNA de fungos podem ser encontrados na literatura, com variantes metodológicas relacionadas às etapas de lise da parede celular fúngica e de recuperação do DNA, o que dificulta a seleção de um método adequado para as espécies de interesse. Diante disto, o presente trabalho tem como objetivo principal fazer um estudo comparativo de diferentes procedimentos de lise da parede celular e de diferentes métodos de recuperação de DNA mais utilizados para fungos dermatófitos nos últimos anos. Para isto serão testadas 07 espécies dermatofíticas e, a partir dos resultados obtidos, pretende-se elaborar um protocolo simplificado para a extração de DNA dessas espécies. FAPEAM 2016-09-23T15:23:40Z 2016-09-23T15:23:40Z 2012-07-31 Relatório de Pesquisa http://riu.ufam.edu.br/handle/prefix/2904 pt_BR Acesso Restrito PDF Universidade Federal do Amazonas Brasil Faculdade de Ciências Farmacêuticas Faculdade de Ciências da Saúde PROGRAMA PIBIC 2011 UFAM |
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Repositório Institucional - Universidade Federal do Amazonas |
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Os dermatófitos constituem um grupo de fungos filamentosos queratinofílicos capazes de parasitar os tecidos queratinizados do homem e de animais como a pele, pêlos e unhas, causando micoses denominadas de dermatofitoses ou tinhas . Estas infecções possuem distribuição universal, com elevada prevalência na maioria das regiões do mundo, embora exista ampla variação na incidência das diferentes espécies dermatofíticas. As tinhas incluem uma variedade de manifestações clínicas que podem acometer indivíduos de ambos os sexos e de todas as faixas etárias, sendo consideradas um problema em saúde pública (LOPES, 1999; SIDRIM. 2004; LACAZ, 2005; REZENDE et al, 2008).
Os métodos laboratoriais convencionais de diagnóstico micológico baseiam-se principalmente nas características morfológicas do fungo, e, nem sempre permitem uma clara definição do agente etiológico em nível de espécie, além de exigir um tempo relativamente longo e uma equipe técnica especializada para os estudos da macro e micromorfologia das colônias. Diante disto, as ferramentas de biologia molecular, em especial a técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) apresenta-se como uma alternativa muito promissora para maior rapidez e eficiência no diagnóstico das dermatofitoses. No entanto, uma etapa fundamental para a obtenção de bons resultados nos protocolos de amplificação de DNA, refere-se ao isolamento e a purificação do mesmo, e no que diz respeito aos fungos, é de fundamental importância considerar que a grande variabilidade morfológica encontrada entre as diferentes espécies fúngicas pode interferir na qualidade e no rendimento do DNA extraído. Diferentes protocolos para a extração de DNA de fungos podem ser encontrados na literatura, com variantes metodológicas relacionadas às etapas de lise da parede celular fúngica e de recuperação do DNA, o que dificulta a seleção de um método adequado para as espécies de interesse. Diante disto, o presente trabalho tem como objetivo principal fazer um estudo comparativo de diferentes procedimentos de lise da parede celular e de diferentes métodos de recuperação de DNA mais utilizados para fungos dermatófitos nos últimos anos. Para isto serão testadas 07 espécies dermatofíticas e, a partir dos resultados obtidos, pretende-se elaborar um protocolo simplificado para a extração de DNA dessas espécies. |
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Maria Zeli Moreira Frota |
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