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Relatório de Pesquisa
Detecção copromolecular da bactéria Helicobacter pylori em uma amostra rural da cidade de Coari-AM
A bactéria Helicobacter pylori está associada com o desenvolvimento de várias patologias gástricas. Enfatiza-se uma crescente necessidade da detecção dessas patologias precocemente devido à infecção pela H. pylori ser adquirida na infância e se não diagnosticada e tratada a tempo pode evoluir para p...
Autor principal: | Arthur da Silva Ribeiro |
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Grau: | Relatório de Pesquisa |
Idioma: | pt_BR |
Publicado em: |
Universidade Federal do Amazonas
2016
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oai:localhost:prefix-44072021-11-26T14:33:26Z Detecção copromolecular da bactéria Helicobacter pylori em uma amostra rural da cidade de Coari-AM Arthur da Silva Ribeiro Jocilene Guimarães Silva Jocilene Guimarães Silva Robson Adriano Gomes dos Santos Rhuana Maria de Oliveira Pereira http://lattes.cnpq.br/9807280492673380 Helicobacter pylori Ensaio Copromolecular Coari CIÊNCIAS BIOLÓGICAS: BIOQUÍMICA A bactéria Helicobacter pylori está associada com o desenvolvimento de várias patologias gástricas. Enfatiza-se uma crescente necessidade da detecção dessas patologias precocemente devido à infecção pela H. pylori ser adquirida na infância e se não diagnosticada e tratada a tempo pode evoluir para patologias mais severas. Em alguns casos o longo tempo de colonização pode evoluir para uma patologia gastointestinal mais grave no decorrer da infecção. Atualmente, a maioria das técnicas de diagnósticos disponíveis para essa infecção necessitam de endoscopia, um método invasivo, traumático e não recomendável em populações pediátricas além de ser inexistente em comunidades ribeirinhas Amazônicas dessa maneira do ponto de vista clínico-epidemiológico, a padronização de um ensaio copromolecular, que utilize amostras de fácil coleta, transporte, armazenamento, assim como sensível, especifico e não-invasivo para diagnóstico da infecção por H. pylori, em crianças, adolescentes e pacientes assintomáticos é de suprema importância para amplificar nosso limitado entendimento da doenças relacionadas ao H. pylori. Nesse contexto o objetivo deste trabalho é diagnosticar a infecção pela bactéria Helicobacter pylori, em amostra rural da cidade de Coari-Am, através de análise copromolecular, contribuindo para o estabelecimento de metodologias de detecção precoce dessa afecção. Metodologia consistirá da aplicação de testes sorológicos comparativos ao teste molecular. As amostras de plasma serão testadas para anticorpos sistêmicos do tipo IgG, anti-H. pylori específicos através de um ensaio imunoenzimático, usando o Kit RIDASCREEN Helicobacter IgG (R-Biopharm AG, Alemanha). O DNA bacteriano será extraído utilizando o QIAamp DNA mini Kit (QIAGEN, Alemanha), a técnica de extração será ajustada para extração de DNA de amostras fecais. O DNA bacteriano, será amplificado por PCR (Reação em Cadeia de Polimerase) um segmento gênico presente em todas as cepas de H. pylori, utilizando-se os primers rRNA 16S que amplifica um fragmento gênico de 1200bp do gênero Helicobacter e os primers P1 e P2, os quais amplificam um fragmento gênico de 298pb que codifica uma proteína antigênica especifica da H. pylori. CNPQ 2016-09-23T15:46:53Z 2016-09-23T15:46:53Z 2015-07-31 Relatório de Pesquisa http://riu.ufam.edu.br/handle/prefix/4407 pt_BR Acesso Restrito PDF Universidade Federal do Amazonas Brasil ISB - Instituto de Saúde e Biotecnologia (Coari) PROGRAMA PIBIC 2014 UFAM |
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A bactéria Helicobacter pylori está associada com o desenvolvimento de várias patologias gástricas. Enfatiza-se uma crescente necessidade da detecção dessas patologias precocemente devido à infecção pela H. pylori ser adquirida na infância e se não diagnosticada e tratada a tempo pode evoluir para patologias mais severas. Em alguns casos o longo tempo de colonização pode evoluir para uma patologia gastointestinal mais grave no decorrer da infecção. Atualmente, a maioria das técnicas de diagnósticos disponíveis para essa infecção necessitam de endoscopia, um método invasivo, traumático e não recomendável em populações pediátricas além de ser inexistente em comunidades ribeirinhas Amazônicas dessa maneira do ponto de vista clínico-epidemiológico, a padronização de um ensaio copromolecular, que utilize amostras de fácil coleta, transporte, armazenamento, assim como sensível, especifico e não-invasivo para diagnóstico da infecção por H. pylori, em crianças, adolescentes e pacientes assintomáticos é de suprema importância para amplificar nosso limitado entendimento da doenças relacionadas ao H. pylori. Nesse contexto o objetivo deste trabalho é diagnosticar a infecção pela bactéria Helicobacter pylori, em amostra rural da cidade de Coari-Am, através de análise copromolecular, contribuindo para o estabelecimento de metodologias de detecção precoce dessa afecção. Metodologia consistirá da aplicação de testes sorológicos comparativos ao teste molecular. As amostras de plasma serão testadas para anticorpos sistêmicos do tipo IgG, anti-H. pylori específicos através de um ensaio imunoenzimático, usando o Kit RIDASCREEN Helicobacter IgG (R-Biopharm AG, Alemanha). O DNA bacteriano será extraído utilizando o QIAamp DNA mini Kit (QIAGEN, Alemanha), a técnica de extração será ajustada para extração de DNA de amostras fecais. O DNA bacteriano, será amplificado por PCR (Reação em Cadeia de Polimerase) um segmento gênico presente em todas as cepas de H. pylori, utilizando-se os primers rRNA 16S que amplifica um fragmento gênico de 1200bp do gênero Helicobacter e os primers P1 e P2, os quais amplificam um fragmento gênico de 298pb que codifica uma proteína antigênica especifica da H. pylori. |
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