Relatório de Pesquisa

Desenho e caracterização de novas sequências promotoras para biorremediação de mercúrio contaminante

Na natureza existem bactérias que apresentam um conjunto de genes de resistência ao mercúrio denominado operon mer. A expressão gênica do operon mer é regulada pela proteína MerR, que na ausência de Hg2+ forma um complexo MerR-promotor-operador, fazendo com que a enzima RNA polimerase não consiga re...

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Autor principal: Maria Clara Tavares Astolfi
Grau: Relatório de Pesquisa
Idioma: pt_BR
Publicado em: Universidade Federal do Amazonas 2017
Assuntos:
Promotores
Operon mer
Biorremediação
CIÊNCIAS BIOLÓGICAS: BIOQUÍMICA
Acesso em linha: http://riu.ufam.edu.br/handle/prefix/5091
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spelling oai:localhost:prefix-50912021-11-26T14:32:04Z Desenho e caracterização de novas sequências promotoras para biorremediação de mercúrio contaminante Maria Clara Tavares Astolfi Carlos Gustavo Nunes da Silva Adolfo José da Mota http://lattes.cnpq.br/2931501267284226 Promotores Operon mer Biorremediação CIÊNCIAS BIOLÓGICAS: BIOQUÍMICA Na natureza existem bactérias que apresentam um conjunto de genes de resistência ao mercúrio denominado operon mer. A expressão gênica do operon mer é regulada pela proteína MerR, que na ausência de Hg2+ forma um complexo MerR-promotor-operador, fazendo com que a enzima RNA polimerase não consiga reconhecer a região promotora, não havendo síntese do RNA mensageiro. Todavia, na presença de Hg2+, MerR liga-se a esse íon e é deslocada da região do promotor-operador, permitindo a expressão dos genes do operon (MerR, MerT, MerA, MerB etc.). Quando expressas, as proteínas codificadas pelos genes MerT e MerP transportam mercúrio para dentro da célula, possibilitando que a enzima Mercúrio Redutase (MerA) reduza Hg2+ a Hg0, sua forma menos tóxica e volátil (DASH et al, 2012). Existem promotores que foram desenhados para interagir com a RNA polimerase em determinada fase do crescimento bacteriano. Por exemplo: 1) o promotor JK26 desenvolvido por MIKSCH et al. em 2005 apresenta sequências do fator sigma RpoS para interação com a RNA polimerase na fase estacionária do crescimento bacteriano; 2) o promotor Tac desenvolvido em 1983 por BOER et al. é um híbrido do promotor do operon triptofano (tpr) com o promotor lac para funcionar na fase exponencial do crescimento bacteriano.O presente projeto objetiva desenhar novos promotores (para sua posterior síntese) regulados a mercúrio a fim de aumentar o nível da expressão do operon mer tendo como base as principais sequências de interação com a enzima RNA polimerase presentes nos promotores Tac e JK26. Após desenhados e sintetizados, os novos promotores serão acoplados a região estrutural da proteína Green Fluorescent Protein (GFP) para quantificar a expressão e selecionar o melhor e mais forte dos promotores desenhados. O aumento da expressão do operon mer pode viabilizar a utilização deste complexo gênico para tratamento de efluentes contaminados com mercúrio. CNPQ 2017-05-29T18:30:49Z 2017-05-29T18:30:49Z 2016-07-31 Relatório de Pesquisa http://riu.ufam.edu.br/handle/prefix/5091 pt_BR Acesso Restrito PDF Universidade Federal do Amazonas Brasil Biologia Instituto de Ciências Biológicas PROGRAMA PIBIC 2015 UFAM
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