Resumo: A S?ndrome Pulmonar por Hantav?rus (SPH) ? uma doen?a antrozoon?tica emergente reconhecida apenas no Novo Mundo e tem como agentes etiol?gicos os hantav?rus (g?nero Hantav?rus, fam?lia Bunyaviridae), que s?o transmitidos aos humanos atrav?s de inala??o de aeross?is de excretas de roedores infectados. O diagn?stico sorol?gico dos casos suspeitos de SPH ? feito pelo ensaio ELISA para a detec??o de anticorpos das classes IgG e IgM. Sendo assim, este trabalho visa ? express?o de ant?genos recombinantes baseados na nucleoprote?na dos hantav?rus para o uso em t?cnicas de ELISA. Para tal, foi realizada uma avalia??o in silico, com base no alinhamento de sequencias do gene N de hantav?rus Amazonicos, para a an?lise de hidrofobicidade, epitopos, otimiza??o de express?o, seguida de s?ntese comercial. A prote?na N inteira e truncada foram expressas em sistema Escherichia coli (BL21 DE3 Star), seguido de purifica??o por cromatografia de afinidade. Para a avalia??o do reconhecimento dos ant?genos recombinantes em ELISA indireto, foram selecionadas 370 amostras soro/sangue, sendo 140 sabidamente positivas para hantav?rus e 176 sabidamente negativas para hantav?rus, 54 positivas para outros pat?genos, no per?odo de 2006 a 2014. Foi obtido um alvo sol?vel (HTN-120) e tr?s alvos insol?veis (HTN-230/370, HTN-GPGPG e HTN-CONS), dos quais apenas a prote?nas HTN-120 e HTN-CONS foram reconhecidas por imunobloting. Estes ant?genos apresentaram uma sensibilidade de 62,14% e 90% para IgM e 75,71% e 57,14% para IgG, respectivamente. A coorte de amostras testadas apresentou uma diferen?a no reconhecimento das prote?nas ao longo dos anos, por isso, a sensibilidade obtida no per?odo de 2010 a 2014 apresentaram excelentes resultados de 87,40% (IgM) e 97,14% (IgG) para HTN-CONS e 97,14% (IgM) e 79,09% (IgG) para HTN-120. A especificidade obtida para a prote?na HTN-CONS foi de 97,8% (IgG) a 100% (IgM), e para HTN-120 foi de 100% para os dois anticorpos. A an?lise da curva ROC, mostrou que o desempenho de todos os conjuntos (ant?genos/anticorpos) foi estatisticamente significativo (p < 0,0001), representando testes com boa acur?cia. Por fim, conclu?-se que foi obtido dois ant?genos recombinantes com grande potencial para o uso em diferentes t?cnicas imunol?gicas na detec??o de anticorpos contra hantav?rus, isso ser? de grande valia para a rede de vigil?ncia brasileira, tamb?m podendo ser usado em estudos ecoepidemiol?gicos na Amaz?nia brasileira.
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