O termo c?ncer de boca engloba um conjunto de neoplasias que acometem a cavidade oral com diversas etiologias e aspectos histopatol?gicos. No Brasil, o c?ncer de boca ? o quinto c?ncer mais frequente no sexo masculino, com uma estimativa de 11.200 novos casos e 3.500 em mulheres em cada ano do bi?nio 2018-2019. Dos mais de 300 tipos de HPV existentes, 24 foram associados ?s les?es bucais. A infec??o pelo Papilomav?rus Humano (HPV) compreende a um importante fator de risco para o carcinoma de c?lulas escamosas orais, assim como o uso de tabaco e do ?lcool. Esse estudo buscou identificar altera??es nos cromossomos e em regi?es g?nicas, que possam ser associadas aos tumores da cavidade oral infectados ou n?o pelo HPV. As amostras estudadas foram obtidas no Centro Universit?rio do Estado do Par?. Inicialmente considerados um N amostral de 6 amostras que foram divididas em: 3 amostras inseridas em parafina e 3 amostras de tecido fresco provenientes de les?es na cavidade oral. Foi realizada a extra??o do DNA das amostras parafinadas e de tecido fresco utilizando os kits ReliaPrep FFPE gDNAMiniprep Systen e QIAamp DNA Mini Kit, respectivamente. Posteriormente foi feita a quantifica??o e avalia??o da integridade do DNA das amostras atrav?s do espectofot?metro NanoDrop 1000, assim como foi avaliado a qualidade e viabilidade do DNA dos pacientes atrav?s do PCR B-globina humana. Realizou- se o PCR convencional para identifica??o do HPV com os primers GP5+ e GP6+, e tamb?m a tipagem do HPV utilizando os kits INNO-LIPA HPV Genotipagem Extra II (amostras parafinadas) e o sistema Linear Array HPV - ROCHE (tecido fresco). Para a identifica??o de altera??es no n?mero de c?pias entre amostras realizou-se o m?todo aCGH, o qual utilizou a matriz SurePrint G3 Human Cancer CGH+SNP Microarray Kit 4x180K que cont?m cerca de
180.000 sondas que mapeiam genes bem caracterizados, particularmente envolvidos em c?ncer. Ap?s a an?lise espec?fica para identifica??o da infec??o por HPV, as 6 amostras n?o apresentaram positividade para o v?rus, mas diversas altera??es cromoss?micas foram obtidas atrav?s da malignidade das les?es. Foram detectadas 167 CNAs no total nas amostras de les?es malignas, e 52 CNAs no total nas les?es benignas. As regi?es 8p23.1, 14q32.33,17q21.33 foram alteradas em todas as amostras malignas,j? nas amostras benignas foi a regi?o 14q32.33. Foram identificados 377 genes com altera??es nas amostras malignas e 8 genes alterados nas amostras benignas. Os genes FANCD2, CTNNB1, FOXO3, LATS1, MYB, TNFAIP3,FANCC, NOTCH1, KLF4, PTCH1, TNC, TSC1, XPA,MAML2,TSC2, MYH11, BCL2 foram alterados nas 3 amostras malignas (tecido fresco) e os genes MYC, PTCH1, ELAVL1, KEAP1, KIT, KDR, PTPRD, TSC2 foram alterados nas amostras benignas (parafinadas), nenhum em comum entre as amostras. Os genes KDR (4q). MYC (8q), PTPRD (9q), PTCH1 (9q), TSC2 (16q), foram alterados tanto nas amostras de les?es malignas quanto nas benignas. A detec??o de regi?es cromoss?micas alteradas envolvidas em perdas e ganhos gen?micos em nosso estudo foi uma etapa fundamental para a identifica??o de regi?es gen?micas relacionadas ao desenvolvimento da doen?a e de candidatos a marcadores moleculares para CCEO.
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