A malária é um problema da saúde pública amplamente distribuída nas
regiões tropicais e subtropicais do globo. No continente americano, o Plasmodium
vivax é responsável por maior parte das infecções. No ano de 2011, 250.498 casos
de malária foram observados no estado do Amazonas; 80% destes casos foram
causados por Plasmodium vivax.
O objetivo desse trabalho foi Investigar a geração de diversidade do gene
MSP1 de Plasmodium vivax através da análise de mutações pontuais na região do
bloco 2, eventos de precombinação genética.
Para identificar as mutações existentes nas infecções multiclonais e geração
de diversidade em PvMSP1 realizou-se uma série de experimentos,
respectivamente, a extração de DNA genômico do parasita, PCR (Reação da
Polimerase em Cadeia) utilizando primers específicos para o bloco 2, ligação do
fragmento ao vetor de clonagem ( TOPO), transformação utilizando células de E.coli
competentes , seleção de colônias pertencentes a uma mesma amostra,
seqüenciamento de DNA e análise das mutações não sinônimas e sinônimas
quanto sua localização em regiões de predição de epítopos de células B e T (não
sinônimas).
O cálculo da distância genética entre clones recombinantes de uma mesma
amostra pelo programa MEGA 4.0 confirmou a multiclonalidade das amostras. O
alinhamento das sequências de aminoácidos mostrou a presenção de eventos de
recombinação genética utilizando o programa DNASP. As sequências de DNA
obtidas demonstrou outro resultado interessante: várias mutações sinônimas e não
sinônimas num trecho relativamente pequeno de DNA. A diversidade genética
mostrou mais mutações não sinônimas, sendo que maior parte delas estavam
localizadas em regiões previstas como epítopos das células B e T pelo programa
BcPred e ProPred.
Assim, como esperado, a diversidade genética baseado nas mutações
sinônimas e não sinônimas sustenta o fenômeno de escape sobre a imunidade do
hospedeiro. A caracterização desses polimorfismos poderá contribuir para estudos
imunológicos visando o desenvolvimento de uma vacina contra os estágios
eritrocitários da malária causada por P.vivax.
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