Enzimas hidrolíticas são utilizadas em diversos ramos da indústria e da biotecnologia,
dentre elas, as proteases e as quitinases. Estas enzimas são secretadas por fungos que causam
patologias em diversos organismos, representando um importante fator de virulência para os
mesmos. O objetivo deste trabalho foi isolar fungos de percevejo de renda (Vatiga illudens) e
cochonilha (Orthezia sp.), avaliar o potencial proteolítico dos extratos dos isolados,
determinar a temperatura e pH ótimo da enzima, bem como realizar a purificação parcial de
proteases e quitinases produzidas. Para isolamento de fungos os insetos foram colocados em
câmara úmida a 25 º C, seguido do cultivo em ágar Sabouraud. Os fungos foram submetidos à
fermentação submersa em meio MGYP. O extrato bruto foi recuperado por filtração a vácuo e
inoculado em cup-plate, em meio sólido com caseína 10% (p/v) a 37 ° C. O efeito da
temperatura e do pH sobre a atividade proteolítica foi determinada usando azocaseína 1%
(p/v) como substrato, em diferentes tampões de pH (5-10) e temperaturas (25 ° C-60 ° C).
Cinco isolados fúngicos foram selecionados a partir dos obtidos de Vatiga illudens e de
Orthezia sp. Os extratos selecionados foram submetidos à purificação parcial das proteínas
por fracionamento com sulfato de amônio nas frações 0-60% e 60-80% de saturação. Após
diálise, foram determinadas concentração protéica, atividade proteolítica, atividade
quitinolítica, atividade específica, rendimento e fator de purificação de cada uma das frações e
dos extratos brutos. De V. illudens, foram identificados os fungos: Paecilomyces sp. e P.
javanicus. A maior diversidade de fungos foi encontrada em Orthezia sp., representado por
Fusarium decemcellulare, Penicillium aurantiogriseum, P. brevicompactum, P. fellutanum,
P. glabrum e P. solitum. Os ascomicetos foram Eupenicillium javanicum. Os isolados
formaram halos de 10-19 mm de diâmetro em meio sólido e o extrato bruto expressou
atividade proteolítica variando entre 1,40-27,07 U/mL. A atividade enzimática da temperatura
e pH ótimo variou entre os isolados. Na fração F2 (60-80%) foram registradas as maiores
atividades específicas tanto de protease quanto de quitinase. Nos extratos semipurificados de
P. brevicompactum (C3) e P. fellutanum (C1) foram observadas as maiores atividades
específicas de protease (18,72 U/mg) e quitinase (0,88 μg/mg), respectivamente.
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