Tese

Purificação e caracterização da lacase do fungo Trametes cubensis (Mont.) Sacc. 1891

O crescente interesse pelas enzimas fúngicas vem em função da sua potencialidade para uso industrial, bem como na pesquisa biotecnológica. Neste contexto, a enzima lacase (EC 1.10.3.2) destaca-se pelo seu potencial uso em diversas aplicabilidades industriais. Assim, o objetivo dessa pesquisa foi car...

ver descrição completa

Autor principal: Damasceno, Andrey Azedo
Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/6824315527850712
Grau: Tese
Idioma: por
Publicado em: Universidade Federal do Amazonas 2017
Assuntos:
Proteínas fúngicas
Prospecção de biomoléculas
Cogumelos
CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Acesso em linha: http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5747
id oai:https:--tede.ufam.edu.br-handle-:tede-5747
recordtype dspace
spelling oai:https:--tede.ufam.edu.br-handle-:tede-57472018-11-08T18:53:26Z Purificação e caracterização da lacase do fungo Trametes cubensis (Mont.) Sacc. 1891 Damasceno, Andrey Azedo Campos, Ceci Sales http://lattes.cnpq.br/6824315527850712 http://lattes.cnpq.br/9752987836124768 Proteínas fúngicas Prospecção de biomoléculas Cogumelos CIÊNCIAS BIOLÓGICAS O crescente interesse pelas enzimas fúngicas vem em função da sua potencialidade para uso industrial, bem como na pesquisa biotecnológica. Neste contexto, a enzima lacase (EC 1.10.3.2) destaca-se pelo seu potencial uso em diversas aplicabilidades industriais. Assim, o objetivo dessa pesquisa foi caracterizar a enzima lacase produzida pelo fungo amazônico Trametes cubensis. A cepa de T. cubensis foi coletada na Floresta Nacional de Tefé (FLONA) e determinada a atividade enzimática a partir da fermentação submersa e semi-sólida. Como substrato testou-se serragem da madeira de Simarouba amara e bagaço-de-cana de açúcar. Como indutores utilizou-se sulfato de cobre, ABTS e meio mineral. A lacase foi purificada por meio de cromotografia de troca iônica e caracterizada quanto à massa (SDS-PAGE e zimograma) e determinados os parâmetros cinéticos Km e Vmax. A atividade de lacase mais expressiva ocorreu no meio com substrato de Simarouba amara (marupá) com 184 U/mL. O rendimento foi de 40% e fator de purificação de 1,5, com Vmax e Km de 33,33 μmol.L-1 6,66 mM, respectivamente. A lacase proveniente de Trametes cubensis apresenta massa molecular aparente de, aproximadamente, 40 kDa. Nesse sentido, a partir do cultivo de Trametes cubensis é possível obter lacases, contudo, estudos ainda são necessários no que se refere ao uso de diferentes indutores, visando uma potencialização dessa atividade. The following interest in fungal enzymes comes about their potential for industrial use, as well as biotechnological research. In this context, the enzyme laccase (EC 1.10.3.2) stand out by its potential use in several industrial applications. Thus, the main goal of this research was to characterize the laccase enzyme produced by the Amazonian fungus Trametes cubensis. The T. cubensis strain was collected in Tefé National Forest (FLONA) and the enzymatic activity was determined from the submerged and semi-solid fermentation. As substrate, sawdust of the wood of Simarouba amara and sugarcane bagasse was tested. As inductors, copper sulfate, “ABTS” and mineral medium were used. The laccase was purified by means of ion exchange chromotography and characterized by mass (SDS-PAGE and zymogram) and determined kinetic parameters Km and Vmax. The most expressive laccase activity occurred in the medium with substrate of Simarouba amara (marupá) with 184 U / mL. The yield was 40% and purification factor of 1.5, with Vmax and Km of 33.33 μmol.L-1 6.66 mM, respectively. The becoming laccase from Trametes cubensis has an apparent molecular mass of approximately 40 kDa. In this way, from the cultivation of Trametes cubensis, it is possible to obtain laccases, however, the study is still necessary in reference the use of different inductors, looking for a potentialization of this activity. CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico 2017-07-31T15:38:57Z 2016-05-27 Tese DAMASCENO, Andrey Azedo. Purificação e caracterização da lacase do fungo Trametes cubensis (Mont.) Sacc. 1891. 2016. 68 f. Tese (Doutorado em Biotecnologia) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2016. http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5747 por Acesso Aberto http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ application/pdf Universidade Federal do Amazonas Instituto de Ciências Biológicas Brasil UFAM Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia
institution TEDE - Universidade Federal do Amazonas
collection TEDE-UFAM
language por
topic Proteínas fúngicas
Prospecção de biomoléculas
Cogumelos
CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
spellingShingle Proteínas fúngicas
Prospecção de biomoléculas
Cogumelos
CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Damasceno, Andrey Azedo
Purificação e caracterização da lacase do fungo Trametes cubensis (Mont.) Sacc. 1891
topic_facet Proteínas fúngicas
Prospecção de biomoléculas
Cogumelos
CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
description O crescente interesse pelas enzimas fúngicas vem em função da sua potencialidade para uso industrial, bem como na pesquisa biotecnológica. Neste contexto, a enzima lacase (EC 1.10.3.2) destaca-se pelo seu potencial uso em diversas aplicabilidades industriais. Assim, o objetivo dessa pesquisa foi caracterizar a enzima lacase produzida pelo fungo amazônico Trametes cubensis. A cepa de T. cubensis foi coletada na Floresta Nacional de Tefé (FLONA) e determinada a atividade enzimática a partir da fermentação submersa e semi-sólida. Como substrato testou-se serragem da madeira de Simarouba amara e bagaço-de-cana de açúcar. Como indutores utilizou-se sulfato de cobre, ABTS e meio mineral. A lacase foi purificada por meio de cromotografia de troca iônica e caracterizada quanto à massa (SDS-PAGE e zimograma) e determinados os parâmetros cinéticos Km e Vmax. A atividade de lacase mais expressiva ocorreu no meio com substrato de Simarouba amara (marupá) com 184 U/mL. O rendimento foi de 40% e fator de purificação de 1,5, com Vmax e Km de 33,33 μmol.L-1 6,66 mM, respectivamente. A lacase proveniente de Trametes cubensis apresenta massa molecular aparente de, aproximadamente, 40 kDa. Nesse sentido, a partir do cultivo de Trametes cubensis é possível obter lacases, contudo, estudos ainda são necessários no que se refere ao uso de diferentes indutores, visando uma potencialização dessa atividade.
author_additional Campos, Ceci Sales
author_additionalStr Campos, Ceci Sales
format Tese
author Damasceno, Andrey Azedo
author2 http://lattes.cnpq.br/6824315527850712
author2Str http://lattes.cnpq.br/6824315527850712
title Purificação e caracterização da lacase do fungo Trametes cubensis (Mont.) Sacc. 1891
title_short Purificação e caracterização da lacase do fungo Trametes cubensis (Mont.) Sacc. 1891
title_full Purificação e caracterização da lacase do fungo Trametes cubensis (Mont.) Sacc. 1891
title_fullStr Purificação e caracterização da lacase do fungo Trametes cubensis (Mont.) Sacc. 1891
title_full_unstemmed Purificação e caracterização da lacase do fungo Trametes cubensis (Mont.) Sacc. 1891
title_sort purificação e caracterização da lacase do fungo trametes cubensis (mont.) sacc. 1891
publisher Universidade Federal do Amazonas
publishDate 2017
url http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5747
_version_ 1831969511644856320
score 11.753735

Registros relacionados