O microambiente tumoral é um determinante na regressão ou
progressão do tumor apresentando a capacidade de modular as células tumorais. O
estudo do efeito antineoplásico de quimioterápicos, abrange a modulação das
células presentes no microambiente do tumor. Em adição, no cenário de
fitoterápicos com ação antineoplásica, o guaraná (Paullinia cupana) tem emergido
como um candidato promissor. Objetivo: O objetivo deste trabalho consistiu em
avaliar o efeito direito do extrato hidroalcoólico de guaraná (EHG) em diferentes
linhagens celulares e o efeito dos meios condicionados (MCs) em macrófagos e em
células epiteliais normais pré-tratadas com EHG no perfil proliferativo e migratório de
células tumorais de mama e de pulmão. Materiais e Métodos: Os valores da
concentração inibitória mínima do EHG, bem como a atividade antioxidante e
avaliação do perfil de morte foram conduzidos em linhagens celulares. Os meios
condicionados foram gerados nas células pré-tratadas com a maior concentração
não citotóxica de EHG. Os efeitos do secretoma foram avaliados nas células
tumorais pelos ensaios de viabilidade, clonogenicidade, migração celular e análise
do perfil do ciclo celular. Resultados: A caracterização por RP-HLPC identificou a
presença das metilxantinas cafeína, teobromina e teofilina, bem como catequina no
EHG. O perfil de viabilidade e os valores de CI50 foram heterogêneos entre as
distintas linhagens celulares: MDA-MB231, MCF7, MCF10A, A549, BEAS-2B, NIH-
3T3, MRC5, NCTC clone 929, THP-1 diferenciada em macrófago. A linhagem mais
resistente A549 adenocarcinoma de pulmão (CI50=17.652±10.22 μg/ml), enquanto a
mais sensível foi o fibroblasto murino (CI50=1.504±34.78 μg/ml). Tratamento com
EHG reduziu os níveis de espécies reativas de oxigênio (EROs) na linhagem MDA-
MB 231 e em THP-1 diferenciada em macrófagos em condição de estresse
oxidativo. O tratamento direto de EHG direciona células BEAS-2B para um perfil de
morte por apoptose. Os meios condicionados (MCs) gerados em MCF10A tratada ou
não com EHG reduziram a viabilidade e a capacidade clonogênica, elevando o
número de células tumorais A549 na fase G1 do ciclo celular. Ademais, estes
secretomas promoveram a redução da capacidade clonogênica das células tumorais
de mama MCF-7. O MC gerado em BEAS-2B previamente tratadas com EHG
aumentou a capacidade de fechamento de ferida de A549 com redução da sua
capacidade clonogênica. O secretoma de células THP-1 diferenciadas em
macrófagos reduz a viabilidade de MCF-7, ao passo que o MC gerado em
macrófagos desafiados com LPS é capaz de restaurar a viabilidade. Células A549
aumentam o percentual de migração quando incubadas com o secretoma de células
diferenciadas em macrófagos pré-tratadas com EHG e estimulado com LPS.
Adicionalmente, observa-se alteração morfológica de tais células tumorais com a
formação de vacúolos, morfologia fusiforme e perda da adesão célula-célula.
Conclusão: Os MCs gerado em BEAS-2B, MCF10A e THp-1 diferenciadas em
macrófagos agem de modo distinto na capacidade proliferativa das linhagens
tumorais estudadas. No entanto, observa-se que o secretoma de células pré-
tratadas com EHG aumentaram a capacidade migratória de A549. Experimentos
futuros são necessários para elucidar o mecanismo de EHG na modulação do
secretoma de macrófagos, bem como avaliar a indução do processo de transição
epitélio-mesenquimal nas células tumorais tratadas com o meio condicionado.
|
